Biologische microscoop met betrekking tot het volume van weefselblokken
Biologische microscopie Tot nu toe zijn koude fixatie, bevroren ultradunne coupes en vriesdrogen routinemethoden voor röntgenmicrosecties van weefsels en cellen. Hieronder volgen de details van deze methode:
Biologische microscopen. Bij microscopen met een condensor kan de condensor op en neer worden bewogen om een gematigde helderheid te bereiken. Bovendien kan de opening van de variabele lichtgevende dioden worden gewijzigd om een gematigde 9b-helderheid te bereiken. Als het licht helder is, kan de condensor op passende wijze omhoog worden gebracht en kan de opening van het variabele licht op passende wijze worden vergroot. Als het licht te sterk is, kan de condensor op passende wijze worden neergelaten en kan de opening van de kruislichtbundel op passende wijze worden verkleind. Als u zich in deze situatie nog steeds verblind voelt, kunt u een geschikt filter kiezen en deze op de beugel onder de condensor plaatsen. Op deze manier kunt u de helderheid krijgen die u bevredigt. Natuurlijk vergt het enige oefening om ervaring op te doen met het aanpassen van de op- en neerwaartse positie van de condensor om een variabele diafragmagrootte te bereiken en het selecteren van geschikte filters.
Een heel belangrijk probleem bij de biologische microscopie is dat tijdens het proces van het verzamelen en scheiden van cellen, na het vriesdrogen en het inbedden van hars (FD), na het invriezen van ultradunne pellets en na het vriesdrogen, de inhoud van 65 elementen van elk onderdeel moet zeer zorgvuldig worden geanalyseerd en beschadig de te analyseren cellen absoluut niet. Omdat röntgenmicrogebiedanalyse niet alleen veel stappen omvat, maar ook veel kost. Als de geanalyseerde cellen na lange tijd en meerdere stappen beschadigde cellen of dode cellen zijn, zou het jammer zijn om verkeerde conclusies te trekken. Hartspiercellen die na behandeling met collagenase zijn geïsoleerd, hebben bijvoorbeeld twee vormen: de ene is lang staafvormig en de andere is rond. Dit laatste zijn stervende cellen die beschadigd raken tijdens celisolatie.
Biologische microscopie De inhoud en verdeling van elektrolyten in deze twee typen cellen zijn zeer verschillend. Na is erg hoog en K is erg laag in ronde hartspiercellen, en de Ca-concentratie in lineaire takken is erg hoog. Na controle met andere analysemethoden werd bewezen dat de hoge Na en lage K in ronde cellen en de hoge Ca in mitochondriën te wijten waren aan de schade aan het celmembraan tijdens het celscheidingsproces. De koude fixatiemethode van cellen en weefsels is vaak om ze eerst te blussen en te fixeren, en ze vervolgens op te slaan in vloeibare stikstof. Het afschrikken en fixeren zijn van groot belang voor het conserverende effect. Levende cellen of verse weefsels zijn rijk aan water. Bij het blussen worden de delen van de cellen of weefsels die in direct contact staan met het cryogeen (vooral wanneer het wordt geblust met vloeibare stikstof) eerst bevroren en gefixeerd, waardoor een "omhulsel" wordt gevormd dat het centrale deel van de cellen verplettert. en koudgefixeerd. Daarom wordt bij X-lijn microgebiedanalyse vaak ontdekt dat er ijskristallen in het midden van grotere cellen zitten. Om dit te voorkomen, wordt een stof met een hoger smeltpunt dan vloeibare stikstof maar een lagere droogheid van -806c gebruikt als gebroken koelmiddel. Er zijn veel van dergelijke stoffen, maar de gemakkelijkste en goedkoopste is geconcentreerd propaan (kookpunt - 42.120c, smeltpunt - 187.10c, molecuulgewicht 44,1), en de afkoelsnelheid is ook het snelst. Maar het nadeel is dat het ontvlambaar is.
Een biologische microscoop kan de spiervezel op een speciaal frame plaatsen. Wanneer de samentrekking van de spiervezels een bepaalde fase bereikt en gerepareerd moet worden, wordt het mondstuk onmiddellijk gestart om vloeibaar propaan naar de spiervezels te spuiten om deze te blussen en te fixeren. Vervolgens werden de spiervezels samen met het frame eruit gehaald en in vloeibare stikstof gebracht. Als bloedcellen of gescheiden cellen worden gefixeerd, centrifugeer dan eerst op lage snelheid om de cellen te concentreren, breng de cellen over naar een kleine zilveren buis met goede thermische geleidbaarheid, plaats de buis in vloeibaar propaan en vries in om deze te fixeren. Wanneer u de alvleesklier van de rat in het Hall-laboratorium fixeert, koelt u eerst de twee stalen blokken voor met vloeibaar helium (of vloeibare stikstof), klemt u de twee koperen blokken vast met een pincet en plaatst u ze voor en na de alvleesklier om de baarmoeder te blussen en te fixeren . Weefsels of cellen kunnen worden geblust en gefixeerd en vervolgens worden overgebracht naar vloeibare stikstof voor langdurige opslag.
