Vergelijking tussen confocale microscopie en conventionele optische microscopie
Microscoop is het belangrijkste hulpmiddel voor het observeren van cellen. Afhankelijk van de verschillende lichtbronnen kan het in twee categorieën worden verdeeld: optische microscopen en elektronenmicroscopen. De eerste gebruikt zichtbaar licht (ultraviolette microscoop gebruikt ultraviolet licht) als lichtbron, terwijl de laatste elektronenbundel als lichtbron gebruikt. Zowel gewone optische microscopen als laserconfocale microscopen behoren tot optische microscopen.
Gewone optische microscoop
Een gewone biologische microscoop bestaat uit drie delen, namelijk: ① verlichtingssysteem, inclusief lichtbron en condensor; ② Het optische versterkingssysteem, bestaande uit een objectief en een oculair, is het hoofdgedeelte van een microscoop. Om sferische en chromatische aberratie te elimineren, zijn zowel het oculair als het objectief samengesteld uit complexe lensgroepen. Mechanisch apparaat, gebruikt om materialen te fixeren en observatie te vergemakkelijken.
De helderheid van het beeld van een microscoop hangt niet alleen af van de vergroting, maar ook van de resolutie. Resolutie verwijst naar het vermogen van een microscoop (of een menselijk oog op een afstand van 25 cm van het doel) om objecten met kleine tussenpozen te onderscheiden. De grootte van de resolutie hangt af van de golflengte van het licht, de diafragma-index en de brekingsindex van het medium. Het wordt uitgedrukt als: R=0.61 λ/NANA=nsin /2, waarbij n=de brekingsindex van het medium; =diafragmahoek (de hoek waaronder het monster de lensopening van het objectief opent), NA=numerieke opening. Is de hoek van de spiegel altijd kleiner dan 180? De maximale waarde van zui voor sina/2 moet dus kleiner zijn dan 1.
De brekingsindex van glas dat wordt gebruikt bij de productie van optische lenzen is 1.65-1.78, en hoe dichter de brekingsindex van het gebruikte medium bij die van glas ligt, hoe beter. Voor droge objectieflenzen is het medium lucht en is de diafragmaverhouding doorgaans 0.05-0.95; De olielens gebruikt cederolie als medium en de diafragmaverhouding kan bijna 1,5 zijn.
De golflengte van gewoon licht is {{0}} nm, dus de resolutiewaarde van de microscoop zal niet minder zijn dan 0.2 μm, en de resolutie van het menselijk oog is 0,2 mm. Daarom is de maximale vergroting voor microscoopontwerp gewoonlijk 1000X.
