Koppeling van AFM en omgekeerde optische microscopie
Omgekeerde optische microscopie in combinatie met AFM-beeldvorming biedt de unieke mogelijkheid om optische gegevens (bijvoorbeeld relatieve verhoudingen of fluorescentiegegevens) te combineren met morfologische beelden met hoge resolutie en mechanische gegevens die alleen een AFM kan bieden.
Dankzij de open optische padontwerpstructuur van de FlexAFM kan het licht vrijwel ongehinderd door de FlexAFM gaan, en het speciale SureAlign™ optische ontwerp van de vrijdragende armbevestiging SA maakt het eenvoudig en gemakkelijk om de FlexAFM te bedienen in vloeistoftestomgevingen zonder de noodzaak van laser uitlijning. In combinatie met de optie voor omgekeerde lichtmicroscopen wordt de FlexAFM dus het ideale apparaat voor het afbeelden en karakteriseren van cellen in een fysiologische omgeving. In dit voorbeeld werden levende Rat-2 fibroblasten in beeld gebracht.
Toepassingen van de FlexAFM in combinatie met een omgekeerde lichtmicroscoop beperken zich zeker niet tot de levenswetenschappen. De onderstaande monsters worden getoond, waarbij gecoate glasmonsters worden geanalyseerd met zowel optische microscopie als AFM. de AFM levert gegevens met een hogere resolutie over het te observeren gebied en legt de aard uit van de structuren die in de optische microscoop te zien zijn. Het kan ook worden gebruikt voor het bepalen van de laagdikte.
Afbeeldingen van PiD-cellen: (links) Relatief vergelijkingsbeeld van omgekeerde lichtmicroscopie door een FlexAFM-apparaat en omgekeerde lichtmicroscopie-optie, met live Rat-2 fibroprogenitorcellen en AFM-hangerarm in celkweekmedium. (Rechts) AFM-afbeelding van cellen onder hetzelfde apparaat, met details van het Rat-2 cytoskelet, dat gemakkelijk waarneembaar is over het celmembraan van deze cellen. AFM-beeldgrootte: 70 μm x 60 μm.
Relatieve verhouding tussen gecoat glas (boven) en AFM-beeld (onder). Waargenomen in de optische microscoop zijn soortgelijke gestructureerde structuren (bijvoorbeeld ovale binnenkanten) die overeenkomen met gaten in de coating, zoals geïllustreerd door AFM-metingen. Ze bieden een **-methode voor het bepalen van de dikte van de coating, die voor dit voorbeeld gelijk is aan 40 nm. AFM-beeldgrootte: 90 μm × 35 μm.
