Verschil tussen fluorescentiemicroscoop en gewone optische microscoop
Het verschil tussen fluorescentiemicroscoop en gewone optische microscoop, fluorescentiemicroscoop en gewone optische microscoop zijn anders, het is niet door de verlichting van de gewone lichtbron om het monster te observeren, maar door het gebruik van een bepaalde golflengte van licht (meestal ultraviolet, blauwviolet) excitatie van het preparaat onder de microscoop in het fluorescerende materiaal, zodat het fluorescerend licht uitzendt, zodat de rol van de fluorescentiemicroscoop in de lichtbron geen directe verlichting is, maar als een soort stimulatie van specimens van de fluorescentie van het binnenste licht. De bron van de fluorescentiemicroscoop is geen directe verlichting, maar een energiebron om de fluorescerende substantie in het preparaat te stimuleren. De reden waarom we het monster kunnen observeren is niet te wijten aan de verlichting van de lichtbron, maar aan het fluorescentieverschijnsel dat wordt gepresenteerd door de fluorescerende substantie in het monster na het absorberen van de opgewonden lichtenergie. Het is duidelijk dat de kenmerken van de fluorescentiemicroscoop voornamelijk zijn dat de lichtbron een groot aantal specifieke golflengtegebieden van excitatielicht kan leveren, zodat de fluorescerende stoffen in het onderzochte exemplaar de noodzakelijke intensiteit van excitatielicht kunnen verkrijgen. Tegelijkertijd moet de fluorescentiemicroscoop over een bijbehorend filtersysteem beschikken. De fluorescentiemicroscoop is het basisinstrument voor **fluorescentiehistochemie. Het is samengesteld uit een ultrahogedruklichtbron, een filtersysteem (inclusief excitatie- en onderdrukkingsfilterplaat), een optisch systeem en een fotografisch systeem en andere belangrijke componenten. Het is het gebruik van een bepaalde golflengte van licht om het monster te stimuleren fluorescentie uit te zenden.
1. de manier van fluorescentie-excitatie: volgens het golflengtebereik van licht is verdeeld in UV-excitatiemethode (met behulp van ultraviolette verlichting) en BV-excitatiemethode (met behulp van blauwviolet licht). Twee soorten UV-excitatiemethoden zijn korter dan 400 nm nabij ultraviolet licht voor opwinding. Bij deze methode is er geen zichtbaar excitatielicht, dus de waargenomen fluorescentie toont de inherente fluorescentie van de kleurstof, en het is gemakkelijk om de specifieke fluorescentie op het monster te onderscheiden van de zelffluorescentie van het achtergrondweefsel.
2. BV-excitatiemethode: De methode is gecentreerd op 404 nm, 434 nm van ultraviolet naar blauw licht voor excitatie. Deze methode maakt gebruik van blauw licht om het monster te bestralen, dus het afsnijfilter van het fluorescentieobservatiesysteem moet een filter gebruiken dat het blauwe licht volledig kan blokkeren en de gewenste groene en gele fluorescentie volledig kan doorlaten. Fluorescerende pigmenten voor de fluorescerende antilichaammethode. Omdat de golflengte van de maximale absorptie van het excitatielicht en de golflengte van de maximale emissie van de fluorescentie dicht bij elkaar liggen, moeten de filters die bij de BV-excitatiemethode worden gebruikt scherpe afsnijfilters zijn. Deze methode gebruikt blauw licht als excitatielicht, waardoor de absorptie-efficiëntie van het fluorochroom hoger is en een helderder beeld kan worden verkregen. Het nadeel is dat fluorescentie onder 500 nm niet zichtbaar is en boven 500 nm het hele beeld geel lijkt. Bij de fluorescerende antilichaammethode wordt het grootste deel van de specificiteit beoordeeld aan de hand van de kleur die uniek is voor het fluorochroom, dus de nadelen van de hierboven beschreven BV-excitatiemethode hebben de neiging extreem invloedrijk te zijn bij het bespreken van subtiele specificiteit.
