Inleiding tot het kiezen tussen omgekeerde microscopen en fluorescentiemicroscopen
Microscoop is een belangrijk instrument in celcultuur en gerelateerde afgeleide experimenten. Momenteel zijn er diverse soorten microscopen op de markt en het kiezen van een microscoop die voldoet aan de wensen en geschikt is, is een uitdaging. Hieronder introduceren we de principes van omgekeerde microscopen en fluorescentiemicroscopen, zodat u gemakkelijk kunt selecteren.
De samenstelling van een omgekeerde microscoop is dezelfde als die van een gewone microscoop en bestaat hoofdzakelijk uit drie delen: mechanisch deel, verlichtingsdeel en optisch deel. De samenstelling van een omgekeerde microscoop is dezelfde als die van een gewone rechtopstaande microscoop, behalve dat de objectieflens en het verlichtingssysteem omgekeerd zijn, waarbij de eerste onder het podium ligt en de laatste boven het podium. Deze structuur zorgt voor een aanzienlijke toename van de effectieve afstand tussen het verlichtingsfocussysteem en het podium, waardoor het gemakkelijker wordt om dikkere observatie-instrumenten zoals kweekschalen en celkweekflessen te plaatsen (glasplaatjes zijn uiteraard ook acceptabel), terwijl de werkafstand tussen de objectieflens en het materiaal niet erg groot hoeft te zijn. Omgekeerde microscoop wordt gebruikt door medische en gezondheidsinstellingen, universiteiten en onderzoeksinstituten voor het observeren van micro-organismen, cellen, bacteriën, weefselkweek, suspensies, sedimenten, enz. Het kan continu het proces van cel- en bacteriële reproductie en deling in kweekmedium observeren, en kan tijdens dit proces elke toestand vastleggen. Op grote schaal gebruikt op gebieden zoals cytologie, parasitologie, oncologie, immunologie, genetische manipulatie, industriële microbiologie, plantkunde, enz.
Fluorescentiemicroscopie wordt gebruikt om de absorptie, het transport, de distributie en de lokalisatie van stoffen in cellen te bestuderen. Voor het geteste object zijn er twee manieren om fluorescentie te genereren: spontane fluorescentie, die na UV-bestraling direct fluorescentie uitzendt; Secundaire fluorescentie treedt op wanneer het waargenomen object wordt behandeld met fluorescerende kleurstoffen en vervolgens wordt bestraald met ultraviolet licht om fluorescentie uit te zenden. Sommige stoffen in cellen, zoals chlorofyl, produceren spontane fluorescentie bij blootstelling aan ultraviolette straling; Sommige stoffen kunnen zelf geen fluorescentie uitstralen, maar als ze worden gekleurd met fluorescerende kleurstoffen of fluorescerende antilichamen, kunnen ze na bestraling met ultraviolet licht ook secundaire fluorescentie uitstralen. Fluorescentiemicroscoop maakt gebruik van een zeer efficiënte puntlichtbron om een bepaalde golflengte van licht (ultraviolet licht 365 nm of paarsblauw licht 420 nm) uit te zenden via een kleurenfiltersysteem als excitatielicht, dat de fluorescerende stoffen in het preparaat aanzet om verschillende kleuren fluorescentie uit te zenden, en observeert vervolgens door de vergroting van de objectieflens en het oculair. Op deze manier is het, zelfs met zwakke fluorescentie op een sterke achtergrond, gemakkelijk te herkennen en heeft het een hoge gevoeligheid. Het wordt voornamelijk gebruikt voor de studie van celstructuur, functie en chemische samenstelling.
