Principes en structurele kenmerken van fluorescentiemicroscoop
Fluorescentiemicroscoop maakt gebruik van een zeer efficiënte puntlichtbron om een bepaalde golflengte van licht (zoals ultraviolet licht 3650 of paars blauw licht 4200) uit te zenden door een kleurfiltersysteem als excitatielicht, dat fluorescerende stoffen in het monster in het monster uit te stoten om verschillende kleuren van fluorescentie uit te stoten, en vervolgens door de vergroting van de objectieve lens en oogdoek wordt toegestaan. Op deze manier, zelfs met zwakke fluorescentie op een sterke achtergrond, is het gemakkelijk te herkennen en heeft het een hoge gevoeligheid. Het wordt voornamelijk gebruikt voor de studie van celstructuur, functie en chemische samenstelling. De basisstructuur van een fluorescentiemicroscoop bestaat uit een gewone optische microscoop en sommige accessoires zoals een fluorescerende lichtbron, excitatiefilter, dubbele kleurbundelsplitsing en blokkeerfilter. Fluorescerende lichtbron - gebruikt meestal ultrahoge druk kwiklampen (50-200 w), die het licht van verschillende golflengten kan uitstoten, maar elke fluorescerende stof heeft een excitatielichtgolflengte die sterke fluorescentie produceert. Daarom moeten excitatiefilters (meestal ultraviolette, paarse, blauwe en groene excitatiefilters) worden toegevoegd om alleen een bepaalde golflengte van excitatielicht door te gaan en het monster te bestralen, terwijl al het andere licht wordt opgenomen. Na te zijn bestraald met excitatielicht, stoot elke stof zichtbare fluorescentie uit met een golflengte langer dan de bestralingsgolflengte in een zeer korte periode. Fluorescentie heeft specificiteit en is over het algemeen zwakker dan excitatielicht. Om specifieke fluorescentie te observeren, moet een blokkeer (of onderdrukken) filter worden toegevoegd achter de objectieve lens. De functies zijn tweeledig: ten eerste, om excitatielicht te absorberen en te blokkeren van het binnenkomen van het oculair om te voorkomen dat de fluorescentie verstoren en de ogen beschadigen; Ten tweede, om specifieke fluorescentie te selecteren en toe te staan om door te gaan, wat een specifieke fluorescerende kleur vertoont. Twee soorten filters moeten in combinatie worden gebruikt.
