Voor- en nadelen van multiphoton-laserscanmicroscopie
Multi-Photon Laser Scanning Microscopie is een experimentele methode gebaseerd op de laserscanningmicroscooptechnologie, die meer optische snijmogelijkheden biedt bij 3D-observatie. De multifoton-fluorescentie-excitatiemethode maakt gebruik van lange golflengten van rood of nabij-infrarood licht om fluorescerende beelden met hoge resolutie van monsters te verkrijgen met minimale dood van actieve monsters, waardoor het geschikt is voor het afbeelden van levende cellen, vooral dikke levende weefsels zoals hersenschijfjes, embryo's, hele organen en zelfs hele organismen.
De voordelen zijn als volgt:
1, het gebruik van rood licht of infrarood licht excitatie, lichtverstrooiing is klein(de verstrooiing vankleindeeltjes en de golflengte van de vierde macht van de inverse verhouding).
2, vereist geen gaatje, kan meer verstrooide fotonen uit de afbeeldingsdwarsdoorsnede verzamelen.
3, het gaatje kan geen onderscheid maken tussen de verstrooide fotonen die worden uitgezonden door het onscherpe gebied of het brandpuntsgebied, multi-foton in de diepe beeldvormingssignaal-ruisverhouding is goed.
4, excitatie met één foton van ultraviolet of zichtbaar licht dat in de straal wordt gebruikt om het brandpuntsvlak te bereiken voordat het monster gemakkelijk wordt geabsorbeerd en verzwakt, niet gemakkelijk tot diepe excitatie.
5, bij de biologische microscoopobservatie * is de eerste overweging niet om de actieve toestand van het organisme zelf te beschadigen, om de water-, ionenconcentratie, zuurstof- en voedingsstoffencirculatie in stand te houden. Bij lichtobservatiegelegenheden moet zowel thermische als fotonenenergie in de cel blijven zonder schade aan de hoeveelheid bestraling, lichtenergie.
6, multi-fotonenmicroscoop heeft ook veel voordelen. Zoals driedimensionale resolutie, diepte-inbraak, verstrooiingsefficiëntie, achtergrondlicht, signaal-ruisverhouding, controle, enz., Er zijn eerdere lasermicroscopen die de kenmerken niet hebben of die onvergelijkbaar zijn.
Multi-foton confocale laserscanmicroscoop is uitgebreid naar verschillende onderzoeks- en toepassingsgebieden. Het is in staat tot driedimensionale niet-destructieve observatie van monsters in hun natuurlijke staat, en kan de resolutie en signaal-ruisverhouding van het systeem verbeteren. Door gebruik te maken van de verandering van materiaaleigenschappen na excitatie van meerdere fotonen, is het ook mogelijk om driedimensionale opslag van hoogtegegevens en driedimensionale microfabricage in elke richting te realiseren, wat een hoge toepassingswaarde heeft. Er kan worden aangenomen dat met de verdere ontwikkeling van machines, materialen, lasertechnologie en andere technologieën die verband houden met multiphoton confocale microscopie, multiphoton confocale laserscanmicroscoop een grotere ontwikkeling en bredere toepassing zal zijn.
Nadelen zijn als volgt:
1, alleen fluorescentiebeeldvorming.
2, als het monster chromoforen bevat die het excitatielicht kunnen absorberen, zoalspigmenten, het voorbeeldkan thermisch beschadigd raken.
3 is de resolutie iets verlaagd, hoewelhet kan worden verbeterd door gelijktijdig gebruik van een confocaal diafragma, MaarEr zal signaalverlies optreden.
4. De kosten van multiphoton-scanmicroscopie zijn hoog vanwege de beperking van dure ultrasnelle lasers.
