Relatie tussen totale vergroting en resolutie bij olie -onderdompeling microscopie
De doelstellingen van microscopen die worden gebruikt in microbiologisch onderzoek zijn meestal drie typen: lage vergroting (1 {{2 0}} x), hoge vergroting (4 0 x) en olievergadering (100x). Er is ook het woord 'oi' (olie -onderdompeling) die aangeeft dat het de hoogste vergroting heeft tussen de drie. Afhankelijk van de vergroting van het gebruikte oculair, kan het inspectie van het object worden vergroot 1000-1600. In gebruik is het verschil tussen een olie -onderdompelingslens en andere doelstellingen dat er geen luchtlaag is tussen de glazen dia en de objectieve lens, maar een olielaag die een olie -onderdompelingssysteem wordt genoemd. Dit type olie wordt vaak gekozen als cedarwood -olie omdat de brekingsindex n =1. 52, die hetzelfde is als glas. Wanneer het licht door een glazen schuif gaat, kan deze rechtstreeks de objectieve lens binnenkomen door cederolie zonder breking. Als het medium tussen de glazen schuif en de objectieve lens lucht is, wordt het een droog systeem genoemd. Wanneer het licht door de glazen schuif gaat, wordt deze gebroken en verspreid en wordt de hoeveelheid licht die de objectieve lens binnengaat duidelijk verminderd, wat de verlichting van het gezichtsveld vermindert. Het gebruik van oliespiegels verhoogt niet alleen de verlichting, maar verhoogt ook voornamelijk de numerieke opening, omdat de vergrotingsefficiëntie van een microscoop wordt bepaald door zijn numerieke opening. Het zogenaamde numerieke diafragma verwijst naar het product van de helft van de sinus van de maximale hoek waarbij licht wordt geprojecteerd op de objectieve lens (bekend als de lenshoek) vermenigvuldigd door de brekingsindex van het medium tussen de glazen schuif en de objectieve lens. Het kan worden uitgedrukt door de volgende formule: na=n × sin а, waarbij na=numerieke opening; N=refractieve index van het medium; A=De helft van de maximale invallende hoek, dwz de helft van de hoek van de spiegel. Daarom, hoe groter de hoek waarop licht op de objectieve lens wordt geprojecteerd, hoe groter de efficiëntie van de microscoop en de grootte van deze hoek hangt af van de diameter en brandpuntsafstand van de objectieve lens. Ondertussen is de theoretische limiet van A 90 .. sin90. ＝ Daarom, bij het gebruik van lucht als het medium (n =1), neemt het numerieke diafragma niet meer dan 1. Als het gebruik van asfalt als het medium wordt gebruikt, neemt het numerieke opening ook toe. Als de invalshoek van het licht 120o is en de helft van de sinus sin60o =0. 87 is, dan: bij het gebruik van lucht als het medium: na =1 × 0. 87=0. 87; bij het gebruik van water als het medium: na =1. 33 × 0. 87=1. 15; bij gebruik van asfalt als het medium: na =1. 52 × 0. 87=1. 32. De resolutie van een microscoop verwijst naar zijn vermogen om de minimale afstand tussen twee punten te onderscheiden. Het is recht evenredig met de numerieke opening van de objectieve lens en omgekeerd evenredig met de golflengtelengte. Daarom, hoe groter het numerieke diafragma van de objectieve lens, hoe korter de golflengte van de lichtgolf, hoe groter de resolutie van de microscoop en hoe duidelijker de fijne structuur van het inspectie van het object kan worden onderscheiden.
Daarom, hoe groter het numerieke diafragma van de objectieve lens, hoe korter de golflengte van de lichtgolf, hoe groter de resolutie van de microscoop en hoe duidelijker de fijne structuur van het inspectie van het object kan worden onderscheiden. Daarom betekent een hoge resolutie een kleine onderscheidbare afstand, en deze twee factoren zijn omgekeerd evenredig. Sommige mensen beschrijven meestal de resolutie als hoeveel micrometers of nanometers het is, wat de resolutie eigenlijk verwart met de minimale resolutie -afstand. De resolutie van een microscoop wordt weergegeven door de minimale afstand die kan worden opgelost. De minimale afstand die onderscheid kan maken tussen twee punten is λ/2NA, waarbij λ=golflengte van de lichtgolf. De gemiddelde lengte van de lichtgolf die kan worden waargenomen door het blote oog is 0. 55 μm. Als het numerieke diafragma 0 is 65 voor een krachtige objectieve lens, kan het de afstand tussen twee punten onderscheiden als 0. 42 μm. De afstand tussen twee punten onder 0. 42 μm kan echter niet worden onderscheiden, zelfs als een grotere vergroting oculair wordt gebruikt om de totale vergroting van de microscoop te vergroten. Alleen door een grotere objectieve lens te gebruiken met een groter numerieke opening kan de resolutie worden verhoogd. Bij het gebruik van een oliespiegel met een numerieke opening van 1,25 is de minimale afstand tussen twee punten die kunnen worden onderscheiden 0. 55/(2 × 1.25) =0. 22 μm. Daarom kunnen we zien dat als een krachtige objectieve lens met een vergroting van 4 0 maal (na =0. 65) en een oculair met een vergroting van 24 keer wordt gebruikt, hoewel de totale vergroting 96 0} maal is, de minimumresolutiegestafstand slechts 0,42 μm. Als een oliespiegel met een vergroting van 90 keer (na =1. 25) en een oculair met een vergroting van 9 keer wordt gebruikt, hoewel de totale vergroting 810 keer is, kan een afstand van 0,22 μm worden onderscheiden.
