Overeenkomsten en verschillen tussen fasecontrast-, omgekeerde en standaardlichtmicroscopie
Dit soort microscopen zijn allemaal optische microscopen, die zichtbaar licht gebruiken als detectiemethode, wat anders is dan elektronenmicroscopen, scanning tunneling microscopen, atomic force microscopen, enz.
Specifiek:
Fasecontrastmicroscoop, ook wel fasecontrastmicroscoop genoemd. Omdat licht een klein faseverschil zal produceren wanneer het door een transparant monster gaat, en dit faseverschil kan worden omgezet in een verandering in amplitude of contrast in het beeld, kan het faseverschil worden gebruikt voor beeldvorming. Het werd uitgevonden door Fritz Zelnick in de jaren dertig toen hij diffractieroosters bestudeerde. Daarom won hij in 1953 de Nobelprijs voor de natuurkunde. Het wordt momenteel veel gebruikt om contrastbeelden te leveren voor transparante exemplaren zoals levende cellen en kleine organen en weefsels.
Confocale microscopie: het is een optische beeldvormingsmethode die puntsgewijze verlichting en ruimtelijke pinhole-modulatie gebruikt om verstrooid licht uit niet-focale vlakken van het monster te verwijderen. Vergeleken met traditionele beeldvormingsmethoden kan het de optische resolutie en het visuele contrast verbeteren. Het door een puntlichtbron uitgezonden detectielicht wordt gefocusseerd op het object dat door de lens wordt waargenomen. Als het object zich precies in het brandpunt bevindt, moet het gereflecteerde licht via de oorspronkelijke lens terug naar de lichtbron convergeren. Dit is het zogenaamde confocale, of kortweg confocaal. De confocale microscoop voegt een dichroïsche spiegel toe aan het optische pad van het gereflecteerde licht, die het gereflecteerde licht dat door de lens is gegaan in andere richtingen breekt. Er zit een gaatje in de focus. Net in het brandpunt, achter het schot, bevindt zich een fotomultiplicatorbuis (PMT). Men kan zich voorstellen dat het gereflecteerde licht vóór en na de detectielichtfocus door dit confocale systeem gaat en niet op het kleine gaatje kan worden scherpgesteld, en door het schot wordt geblokkeerd. Wat de fotometer dus meet, is de intensiteit van het gereflecteerde licht in het brandpunt. De betekenis is dat een doorschijnend object driedimensionaal kan worden gescand door het lenssysteem te bewegen. Een dergelijk idee werd in 1953 voorgesteld door de Amerikaanse geleerde Marvin Minsky. Na dertig jaar ontwikkeling werd een confocale microscoop ontwikkeld die voldeed aan de idealen van Marvin Minsky, waarbij gebruik werd gemaakt van lasers als lichtbronnen.
Omgekeerde microscoop: De samenstelling is dezelfde als die van een gewone microscoop, behalve dat de objectieflens en het verlichtingssysteem omgekeerd zijn. De eerste bevindt zich onder het podium en de laatste bevindt zich boven het podium. Gemakkelijke bediening en installatie van andere gerelateerde beeldacquisitieapparatuur.
Een optische microscoop is een microscoop die optische lenzen gebruikt om een beeldvergrotingseffect te produceren. Licht dat door een object valt, wordt versterkt door minimaal twee optische systemen (objectieven en oculairs). Ten eerste produceert de objectieflens een vergroot reëel beeld, en het menselijk oog neemt dit vergrote echte beeld waar via het oculair, dat werkt als een vergrootglas. Algemene optische microscopen hebben meerdere verwisselbare objectieven, zodat de waarnemer de vergroting indien nodig kan wijzigen. Deze objectieflenzen worden doorgaans op een draaibare objectieflensschijf geplaatst. Door de objectieflensschijf te draaien, kunnen verschillende oculairs gemakkelijk het optische pad betreden. Natuurkundigen ontdekten de wet tussen vergroting en resolutie, en mensen leerden dat de resolutie van optische microscopen een limiet heeft. Deze resolutielimiet beperkt de oneindige toename van de vergroting. 1600 keer wordt de vergroting van optische microscopen. De hoogste limiet maakt de toepassing van morfologie op veel gebieden zeer beperkt.
De resolutie van een optische microscoop wordt beperkt door de golflengte van het licht, die doorgaans niet groter is dan 0,3 micron. De resolutie kan ook worden verbeterd als de microscoop ultraviolet licht als lichtbron gebruikt of als het object in olie wordt geplaatst. Dit platform werd de basis voor het bouwen van andere optische microscopiesystemen.
