Het juiste gebruik van omgekeerde fluorescentiemicroscopie
Omgekeerde fluorescentiemicroscoop is een multifunctionele microscoop die wordt gebruikt op het gebied van hoogwaardig biologisch wetenschappelijk onderzoek. De structuur ervan is complex en duur. Om ervoor te zorgen dat afgestudeerde medische studenten de werking en gebruiksnormen van de omgekeerde fluorescentiemicroscoop correct onder de knie krijgen, moeten leraren daarom eerst de basiskennis van de omgekeerde fluorescentiemicroscoop aanleren voordat ze de daadwerkelijke werking van de omgekeerde fluorescentiemicroscoop demonstreren. Ze moeten de structuur, het principe, de functie en de basisgebruiksmethoden van de omgekeerde fluorescentiemicroscoop introduceren, en vervolgens verschillende functies voor verschillende specimens bij specifieke gebruiksoperaties demonstreren, waardoor de werking en het gebruik van de omgekeerde fluorescentiemicroscoop geleidelijk worden gestandaardiseerd voor afgestudeerde medische studenten.
1. Correct gebruik van visuele observatie. Eén van de functies van een omgekeerde fluorescentiemicroscoop is waarnemen in een helder gezichtsveld. Het basisprincipe is het verkrijgen van beeldvorming op een heldere achtergrond op basis van de verschillende lichtabsorptie van elk deel van het preparaat nadat het door licht is verlicht. Het is vooral geschikt voor het observeren van gekleurde of gekleurde cellen, weefselcoupes en andere monsters.
2. Correct gebruik van differentiële observatie. De tweede functie van de omgekeerde fluorescentiemicroscoop is faseverschilobservatie. Het basisprincipe is om het optische padverschil van verschillende delen van het monster om te zetten in amplitudeverschil, en te observeren via een faseverschilobjectief met een faseplaat en een spotlight met een cirkelvormige opening. Het is vooral geschikt voor het observeren van levende cellen of ongekleurde weefselcoupes. In het proces van experimenteel lesgeven is het, naast het correct begeleiden van afgestudeerde medische studenten bij het volgen van de basiswerkmethoden van faseverschilobservatie, belangrijker om hen te begeleiden bij het begrijpen en beheersen van de specimens met behulp van faseverschilobservatie. Voor hen is de meest gebruikte methode in toekomstig wetenschappelijk onderzoek microscopische observatie van gekweekte cellen. Ten eerste wordt het voor de selectie van celapparatuur over het algemeen aanbevolen om kweekschalen, platen en flessen te gebruiken die zijn gemaakt van glas en plastic materialen. Ze zijn meestal kleurloos en transparant en kunnen direct worden waargenomen onder een omgekeerde fluorescentiemicroscoop zonder de noodzaak om celvloeistof uit te gieten of andere behandelingen te ondergaan. Ten tweede mag u tijdens microscopische observatie het deksel van de apparatuur niet zomaar openen om besmetting van de cellen te voorkomen. Ten slotte moeten operators handschoenen, maskers en witte jassen dragen om niet alleen hun eigen gezondheid te beschermen, maar ook om celbesmetting te voorkomen.
3. Correct gebruik van fluorescentieobservatie. De derde functie van een omgekeerde fluorescentiemicroscoop is fluorescentieobservatie. Het basisprincipe is om excitatielicht te gebruiken om het monster te exciteren om fluorescentie te produceren, waardoor de vorm en positionering van het monster wordt bereikt. Het is vooral geschikt voor het observeren van fluorescentie-gelabelde monsters. Fluorescentieobservatie is een belangrijke functie van omgekeerde fluorescentiemicroscopie, met dure accessoires en speciaal gebruik. Om ervoor te zorgen dat afgestudeerde medische studenten de operationele normen van fluorescentieobservatie correct onder de knie krijgen, leren leraren hen niet alleen de basisbedieningsmethoden, maar, nog belangrijker, leren ze hen het unieke karakter ervan. Ten eerste moet bij de preparaatvoorbereiding het oppervlak van het objectglaasje en het afdekglas glad zijn en moet de dikte geschikt zijn (het objectglaasje moet tussen 0,8 mm en 1,2 mm liggen, en het afdekglas moet ongeveer {{5 zijn). }}.17 mm); Het monster moet een geschikte dikte hebben en celoverlap of maskering van onzuiverheden vermijden; Het afdichtmiddel moet een gelijk mengsel van glycerol en carbonaatbuffer gebruiken (0.5mol/L pH 9.0-9.5). Ten tweede moeten vóór fluorescentiewaarneming de lichten in de kamer en het witte licht van de omgekeerde fluorescentiemicroscoop worden uitgeschakeld om ervoor te zorgen dat ze zich in een donkere kameromgeving bevinden. Ten slotte moet bij fluorescentieobservatie de observatietijd strikt worden gecontroleerd, doorgaans 1-2 uur per keer, anders zal de fluorescentie vervallen en verdwijnen; Bij het afstellen van de lichtbron moet een veiligheidsbril worden gedragen om UV-schade aan de bril te voorkomen.
4. Correct gebruik van beeldopname. In wetenschappelijk onderzoek is het niet alleen vereist dat omgekeerde fluorescentiemicroscopie meerdere waarnemingen kan bereiken, maar ook dat omgekeerde fluorescentiemicroscopie beeldopname kan bewerkstelligen. Het omgekeerde fluorescentiemicroscoopsysteem combineert een optische microscoop met een computer door middel van foto-elektrische conversie, waardoor niet alleen microscopische observatie op het oculair mogelijk is, maar ook realtime dynamische beeldobservatie, bewerking en opslag op de computer.
