Het principe en de structurele kenmerken van een fluorescentiemicroscoop
Fluorescentiemicroscopie gebruikt een punt met een hoge lichtopbrengst om licht van een bepaalde golflengte (zoals ultraviolet licht 3650 inch of paarsblauw licht 4200 inch) door het filtersysteem uit te zenden als excitatielicht om de fluorescerende stoffen in het monster op te wekken om fluorescentie van verschillende kleuren Observeer daarna door de vergroting van de objectieflens en het oculair. Op deze manier is het onder een sterke contrastachtergrond, zelfs als de fluorescentie erg zwak is, gemakkelijk te identificeren en heeft het een hoge gevoeligheid. Het wordt voornamelijk gebruikt voor het onderzoek naar celstructuur en -functie en chemische samenstelling. De basisstructuur van een fluorescentiemicroscoop bestaat uit een gewone optische microscoop plus enkele accessoires (zoals een fluorescerende lichtbron, een excitatiefilter, een tweekleurenbundelsplitser en een blokkeerfilter, enz.). Fluorescerende lichtbron: gebruik over het algemeen een ultrahogedrukkwiklamp (50-200W), die licht van verschillende golflengten kan uitzenden, maar elke fluorescerende substantie heeft een excitatiegolflengte die de sterkste fluorescentie produceert, dus een excitatiefilter (meestal er zijn ultraviolette, paarse, blauwe en groene excitatiefilters), die alleen excitatielicht van een bepaalde golflengte doorlaten en het monster bestralen, terwijl ze ander licht absorberen. Nadat elke stof is bestraald met excitatielicht, zendt deze in zeer korte tijd zichtbare fluorescentie uit met een langere golflengte dan de bestralingsgolflengte. Fluorescentie is specifiek en over het algemeen zwakker dan excitatielicht. Om specifieke fluorescentie waar te nemen, moet blokkering (of onderdrukking) achter de objectieflens worden toegevoegd en in combinatie daarmee worden gebruikt.
Het verschil tussen fluorescentiemicroscoop en gewone microscoop
1. De verlichtingsmethode is meestal episcopisch, dat wil zeggen dat de lichtbron door de objectieflens op het monster wordt geprojecteerd;
2. De lichtbron is ultraviolet licht, de golflengte is korter en de resolutie is hoger dan die van gewone microscopen;
3. Er zijn twee speciale filters: het filter voor de lichtbron wordt gebruikt om zichtbaar licht uit te filteren, en het filter tussen het oculair en de objectieflens wordt gebruikt om ultraviolette stralen uit te filteren om het menselijk oog te beschermen.
Fluorescentiemicroscoop is ook een soort optische microscoop, het belangrijkste verschil is dat de excitatiegolflengte van de twee verschillend is. Dit bepaalt het verschil tussen de fluorescentiemicroscoop en de gewone optische microscoop qua structuur en gebruik.
Fluorescentiemicroscopie is een essentieel instrument in immunofluorescente cytochemie. Het is samengesteld uit hoofdcomponenten zoals lichtbron, filterplaatsysteem en optisch systeem. Het is om een bepaalde golflengte van licht te gebruiken om het monster op te wekken om fluorescentie uit te zenden, en om het fluorescentiebeeld van het monster waar te nemen door de objectieflens en het oculairsysteem te versterken.
