De speciale structuur van een fluorescentiemicroscoop omvat:
(I) Kleurenfiltersysteem
Kleurenfilter is een belangrijk onderdeel van de fluorescentiemicroscoop, de kerncomponenten ervan zijn het excitatielichtfilter (eerste barrièrefilter), het emissielichtfilter (tweede barrièrefilter) en de halftransparante en half anti-filter (bundelsplitsende spiegel) samenstelling . Diverse fabrikanten van kleurenfiltermodellen, de naam is vaak niet uniform.
1. Excitatielichtfilter en emissielichtfilter: afhankelijk van de lichtbron en de kenmerken van het fluorochroom, kiest u gewoonlijk de volgende drie soorten matching, om een bepaald golflengtebereik van het excitatielicht te bieden, en het monster excitatie van fluorescentie te laten maken het oculair voor de beeldvorming.
UV-excitatie: het excitatielichtfilter maakt de transmissie van UV-licht mogelijk en blokkeert de doorgang van zichtbaar licht boven 400 nm. Het bijbehorende emissiefilter laat blauw licht door, dat in het gezichtsveld blauw lijkt, bijvoorbeeld voor DAPI-kleuring.
Excitatie van blauw licht: Het excitatielichtfilter laat blauw licht door, waardoor andere golflengten van licht worden geblokkeerd. Het bijbehorende emissiefilter laat groen licht door, bijvoorbeeld voor GFP-kleuringsmarkers.
Groene excitatie: Het excitatiefilter laat groen licht door, waardoor andere golflengten worden geblokkeerd. Het bijbehorende emissiefilter laat meestal rood licht door, bijvoorbeeld Rhodamine-kleuring.
2. Half-transparant en half-reflecterend filter: zijn rol is om de excitatie van licht door de reflectie volledig te blokkeren; en door het overeenkomstige golflengtebereik van het uitgezonden licht. Het model en de excitatie van lichtfilters en emissie van lichtfilters komen overeen.
(B) objectieflens en oculair
Er kan een verscheidenheid aan objectieflenzen worden toegepast, maar * goede keuze voor symmetrische, achromatische objectieflenzen, omdat de autofluorescentie erg klein is en de lichttransmissie-eigenschappen (golflengtebereik) geschikt zijn voor fluorescentie. Omdat de fluorescentiehelderheid van het beeld in het gezichtsveld van de microscoop evenredig is met het kwadraat van de snuitsnelheid van het objectief en omgekeerd evenredig met de vergroting ervan, moet het objectief met een grote snuitsnelheid, om de helderheid van het fluorescentiebeeld te verbeteren, worden gebruikt. Vooral omdat de fluorescentie niet sterk genoeg is, moeten specimens een grote mondsnelheid gebruiken, een objectief met hoge lichttransmissie, met een zo laag mogelijke oculair.
(C) andere optische apparaten
Reflector, de reflecterende laag is over het algemeen met aluminium bekleed, omdat aluminium op het ultraviolette en zichtbare licht minder absorbeert in het blauw-violette gebied en tot 90% of meer reflecteert (terwijl de reflectiviteit van zilver slechts 70%) is. Over het algemeen worden vlakke reflectoren gebruikt. Spotspiegel, speciaal ontworpen en vervaardigd voor fluorescentiemicroscopie, spotspiegel gemaakt van kwartsglas of ander UV-transparant glas. Vallend lichtapparaat, dat naast de functie van doorvallende lichtbron meer geschikt is voor ondoorzichtige en doorschijnende exemplaren, zoals dikke film, filtermembraan, kolonie, weefselkweek en andere monsters voor directe observatie. In de afgelopen jaren heeft de ontwikkeling plaatsgevonden van een nieuw type fluorescentiemicroscoop met behulp van vallend lichtapparaat, de zogenaamde vallende fluorescentiemicroscoop.
(D) lichtbron
Tegenwoordig wordt als lichtbron een hogedrukkwiklamp van 50 of 100 W gebruikt. Het werk van de ontlading van de twee elektroden, veroorzaakt door de verdamping van kwik, stijgt de luchtdrukbal snel (dit proces duurt over het algemeen ongeveer 5 ~ 15 minuten), en tijdens het emissieproces van lichtkwanta is de golflengte van het vrijgekomen licht voldoende om te exciteren alle soorten fluorescerende stoffen, daarom wordt voor fluorescentiemicroscopie vaak gebruikt.
Kwiklampen hebben een relatief korte levensduur, doorgaans 200 uur, en als reactie op deze beperking van de levensduur is de afgelopen jaren een nieuwe fluorescentielichtbron, X-Cite, op grote schaal gebruikt vanwege de lange levensduur van de lamp van 2000 uur en het flexibele gebruik ervan. - Voorverwarmen is niet nodig en hij is direct uit de doos klaar voor gebruik.
