De structuur en belangrijkste componenten van een fluorescentiemicroscoop
(1) Lichtbron
Tegenwoordig wordt doorgaans een ultrahogedrukkwiklamp van 200 W als lichtbron gebruikt. Het is gemaakt van kwartsglas, met een bolvorm in het midden en een bepaalde hoeveelheid kwik aan de binnenkant. Tijdens bedrijf zorgt de ontlading tussen de twee elektroden ervoor dat het kwik verdampt en de druk in de bol snel toeneemt. Wanneer het kwik volledig verdampt, kan het een standaard atmosferische druk van 50-70 bereiken, wat doorgaans ongeveer 5-15 minuten duurt. De luminescentie van ultrahogedrukkwiklampen is het resultaat van de ontlading tussen elektroden, die voortdurend kwikmoleculen dissocieert en reduceert en fotonen uitzendt. Het zendt sterk ultraviolet en blauwviolet licht uit, wat voldoende is om verschillende fluorescerende stoffen te exciteren. Daarom wordt het veel gebruikt in fluorescentiemicroscopen.
Ultrahogedrukkwiklampen zenden ook een grote hoeveelheid warmte-energie uit. Daarom moet de lampkamer goede warmteafvoeromstandigheden hebben en mag de temperatuur van de werkomgeving niet te hoog zijn.
De nieuwe ultrahogedrukkwiklamp heeft geen hoge spanning nodig om in een vroeg stadium van gebruik te ontsteken. Na enige tijd gebruik moet het worden gestart met een hoge spanning (ongeveer 15.000 V). Na het starten wordt de werkspanning doorgaans op 50-60V gehouden en bedraagt de werkstroom ongeveer 4A. De gemiddelde levensduur van een ultrahogedrukkwiklamp van 200 W is ongeveer 200 uur bij gebruik gedurende 2 uur per keer. Hoe korter de bedrijfstijd, hoe korter de levensduur. Bij eenmalig gebruik van slechts 20 minuten wordt de levensduur met 50% verkort. Probeer daarom het aantal starts tijdens het gebruik te minimaliseren. De lichtefficiëntie van een gloeilamp neemt tijdens gebruik geleidelijk af. Nadat het lampje uitgaat, moet het wachten op afkoeling voordat het opnieuw wordt opgestart. Na het aansteken van de lamp mag deze niet onmiddellijk worden uitgeschakeld om onvolledige verdamping van kwik en schade aan de elektrode te voorkomen. Over het algemeen moet het 15 minuten wachten. Vanwege de hoge druk en sterke ultraviolette straling van de ultrahogedrukkwiklamp moet de gloeilamp in de lampkamer worden geplaatst voordat deze wordt ontstoken om oogletsel en explosie tijdens bedrijf te voorkomen.
Het circuit van een lichtbron met ultrahogedrukkwiklamp (100 W of 200 W) en de componenten ervan, inclusief spanningstransformatie, stroomonderdrukking en opstarten. Er is een systeem voor het aanpassen van het lichtcentrum van de lamp in de lampkamer, waarbij een met aluminium beklede concave reflector achter de lamp is geïnstalleerd en een lichtopvanglens aan de voorkant is geïnstalleerd.
De in eigen land geproduceerde ultrahogedrukkwiklamp GCQ-200 levert goede prestaties en kan geïmporteerde lampen zoals HBO-200 vervangen, met een gemiddelde levensduur van meer dan 200 uur en een relatief lage prijs.
Een eenvoudig en draagbaar broomwolfraam fluorescerend lichtbronapparaat met hoge kleurtemperatuur, ontwikkeld in China, met een klein volume, lichtgewicht, laag vermogen, dubbel gebruik van AC en DC (met ingebouwde DC-voeding), gemakkelijk mee te nemen, gemakkelijk te gebruiken , is gepromoot en toegepast.
(2) Kleurfiltersysteem
Het kleurenfiltersysteem is een belangrijk onderdeel van een fluorescentiemicroscoop, bestaande uit een excitatiefilterplaat en een compressiefilterplaat. Het model van de filterplaat is vaak inconsistent onder fabrikanten. Filterplaten worden doorgaans genoemd naar de basiskleurtoon, waarbij de eerste letter de kleurtoon vertegenwoordigt, de tweede letter het glas en het getal de modelkenmerken. Olympus-microscoop
(3) Objectieflens
Er kunnen verschillende objectieflenzen worden toegepast, maar het gebruik van achromatische objectieflenzen is geschikt voor fluorescentie vanwege hun extreem lage zelffluorescentie- en transmissieprestaties (golflengtebereik). Vanwege het feit dat de fluorescentiehelderheid van het beeld in het gezichtsveld van de microscoop direct evenredig is met het kwadraat van de diafragmaverhouding van de objectieflens en omgekeerd evenredig met de vergroting ervan, moet, om de helderheid van het fluorescentiebeeld te verbeteren, een objectieflens worden gebruikt. met een grotere diafragmaverhouding moeten worden gebruikt. Vooral bij een hoge vergroting is de impact ervan zeer groot. Daarom moet voor preparaten met onvoldoende fluorescentie een objectieflens met een hoog diafragma worden gebruikt, gecombineerd met een zo laag mogelijk oculair (4 x, 5 x, 6,3 x, enz.).
(4) Reflecterende spiegel
De reflecterende laag van een reflector is over het algemeen met aluminium geplateerd omdat aluminium minder ultraviolet en zichtbaar licht absorbeert in het blauwpaarse gebied, met een reflectie van meer dan 90%, terwijl zilver slechts 70% reflecteert; Over het algemeen worden vlakke reflectoren gebruikt.
(5) Spotspiegel
De concentrator die speciaal is ontworpen en gemaakt voor fluorescentiemicroscopie is gemaakt van kwartsglas of ander glas dat ultraviolet licht doorlaat. Er zijn twee soorten donkerveldspotters met een verschillend gezichtsveld. Er is ook een differentiële fluorescentieconcentrator.
(6) Apparaat voor vallend licht
Het nieuwe type apparaat voor vallend licht reflecteert de kortere golflengtedelen (ultraviolet en paarsblauw) van de lichtbron naar het interferentiespectrofotometerfilter vanwege de eigenschappen van de coating op het filter. Wanneer het filter in een hoek van 45 graden naar de lichtbron is gericht. Wanneer het wordt gekanteld, wordt het verticaal naar de objectieflens gericht en via de objectieflens naar het preparaat gericht, waardoor het preparaat wordt opgewonden. Op dit punt fungeert de objectieflens direct als condensor. Tegelijkertijd zijn de lange delen van het filter (groen, geel, rood etc.) transparant voor het filter, zodat ze niet reflecteren in de richting van het objectief. Het filter fungeert als een excitatiefilterplaat en omdat de fluorescentie van het monster zich in het lange golflengtegebied van zichtbaar licht bevindt, kan deze door het filter worden waargenomen en het doel worden bereikt. De helderheid van het fluorescentiebeeld neemt toe met de vergroting en is sterker dan de doorgelaten lichtbron bij sterke vergroting. Naast zijn functie als doorlatende lichtbron is hij meer geschikt voor directe observatie van ondoorzichtige en semi-transparante preparaten, zoals dikke platen, filtermembranen, kolonies, weefselkweekspecimens, enz. De laatste jaren zijn nieuw ontwikkelde fluorescentiemicroscopen vaak gebruik vallende lichtapparaten, ook wel vallende lichtfluorescentiemicroscopen genoemd.
