Drie soorten microscoopobservatie
I. Helderveld BF (Helderveld BF)
Bright field BF is een bekende manier van microscopie, die veel wordt gebruikt in de pathologie en bij testen voor het observeren van gekleurde coupes, en alle microscopen kunnen deze functie vervullen.
Helder veld
II. Donkerveld DF (Donkerveld DF)
Donkerveld DF is eigenlijk donkerveldverlichting. Het verschilt van helder veld doordat het niet direct het verlichte licht waarneemt, maar het licht dat wordt gereflecteerd of afgebogen door het onderzochte object. Als gevolg hiervan wordt het gezichtsveld een donkere achtergrond, terwijl het onderzochte object als een helder beeld verschijnt.
Het principe van het donkere gezichtsveld is gebaseerd op het Tyndall-fenomeen in de optica, waarbij stof bij sterk licht door direct licht niet door het menselijk oog kan worden waargenomen, dit komt door het sterke licht rondom de oorzaak. Als het licht er schuin op wordt gericht, lijken de deeltjes door de reflectie van licht in omvang toe te nemen en worden ze zichtbaar voor het menselijk oog.
Een speciaal accessoire dat nodig is voor donkerveldobservatie is een donkerveldtelescoop. Het wordt gekenmerkt door het niet toestaan dat de lichtstraal van onder naar boven door het onderzochte object gaat, maar door het pad van het licht te veranderen zodat het schuin naar het onderzochte object wordt gericht, zodat het verlichtende licht niet direct in het onderzochte object binnendringt. objectieflens, en een helder beeld wordt gevormd door gebruik te maken van het gereflecteerde of afgebogen licht van het oppervlak van het onderzochte object. De resolutie bij donkerveldwaarneming is veel hoger dan bij helderveldobservatie, * tot 0.02-0.004
Donker veld
III. Fasecontrast PH
Bij de ontwikkeling van optische microscopie is de succesvolle uitvinding van fasecontrast PH een belangrijke prestatie in de moderne microscopietechnologie. Zoals we weten kan het menselijk oog alleen de golflengte (kleur) en amplitude (helderheid) van lichtgolven onderscheiden. Bij kleurloze en heldere biologische exemplaren veranderen de golflengte en amplitude niet veel wanneer het licht er doorheen gaat, en het is moeilijk om het monster te observeren in de helderveldobservatie.
Fasecontrastmicroscoop gebruikt het verschil in het lichtbereik van het onderzochte object voor microscopisch onderzoek, dat wil zeggen dat het effectief het interferentiefenomeen van licht gebruikt om het niet te onderscheiden faseverschil van het menselijk oog te veranderen in het te onderscheiden amplitudeverschil, en zelfs kleurloos en transparant stoffen kunnen duidelijk zichtbaar worden. Dit vergemakkelijkt de observatie van levende cellen aanzienlijk, daarom wordt fasecontrastmicroscopie veel gebruikt in omgekeerde microscopen.
Het basisprincipe van fasecontrastmicroscopie is dat het verschil in optisch bereik van zichtbaar licht dat door een monster wordt doorgelaten, wordt omgezet in een verschil in amplitude, waardoor het contrast tussen verschillende structuren wordt vergroot en zichtbaar wordt. Het licht wordt door het preparaat gebroken en wijkt af van het oorspronkelijke lichtpad, terwijl het wordt vertraagd met 1/4λ (golflengte). Als de 1/4λ weer wordt verhoogd of verlaagd, wordt het optische bereikverschil 1/2λ en wordt de interferentie tussen de twee fotosynthesebundels versterkt nadat de assen van de twee bundels zijn verstoord, en neemt de amplitude toe of af, dus het verbeteren van het contrast. In de structuur heeft de fasecontrastmicroscoop twee speciale kenmerken die verschillen van een gewone optische microscoop:
1. Het ringvormige diafragma (annulardiafragma) bevindt zich tussen de lichtbron en de condensor. De rol is om het licht door de condensor te laten gaan om een holle lichtkegel te vormen, gericht op het preparaat.
2. faseplaat (annularphaseplate) in de objectieflens bedekt met magnesiumfluoride faseplaat, direct of diffractielicht kan fase 1/4λ worden vertraagd. Er zijn twee soorten:
1. Een faseplaat: het directe licht vertraagd 1/4 λ, twee groepen lichtgolven coaxiale lichtgolftoevoeging, amplitudetoename, de specimenstructuur dan het omringende medium is helderder, de vorming van helder contrast (of negatief contrast) .
2.B faseplaat: het afgebogen licht wordt vertraagd met 1/4 λ, de twee groepen lichtgolven worden na het samenvoegen van de as van de lichtgolf verminderd, de amplitude wordt kleiner, de vorming van donker contrast (of positief contrast ), is de structuur donkerder dan het omringende medium.
