Wat is donkerveldmicroscopie? Hoe klein kun je een cel zien?
Donkerveldmicroscoop is een soort optische microscoop, ook wel ultramicroscoop genoemd. Er bevindt zich een lichtscherm in het midden van de condensor van een donkerveldmicroscoop, zodat het verlichtingslicht niet rechtstreeks de menselijke lens binnendringt. Alleen het licht dat door het preparaat wordt gereflecteerd en afgebogen, mag de objectieflens binnendringen. Daarom is de achtergrond van het gezichtsveld zwart en zijn de randen van de objecten helder. van. Dit soort microscoop kan deeltjes zo klein als 4 ~ 200 nm zien, en de resolutie kan 50 keer hoger zijn dan die van gewone microscopen.
beginsel
De donkerveldmicroscoop is aangepast op basis van de structuur van een gewone optische microscoop door gebruik te maken van het principe van het optische Tyndall-effect. Donkerveldcondensatoren zorgen ervoor dat de centrale straal van de lichtbron wordt geblokkeerd. Het is niet mogelijk om van onder naar boven door het preparaat in de objectieflens te komen. Als gevolg hiervan verandert het licht van pad en straalt het schuin op het waargenomen exemplaar. Het exemplaar wordt gereflecteerd of verstrooid wanneer het in aanraking komt met licht. Het verstrooide licht wordt in de objectieflens geworpen, waardoor het gehele gezichtsveld donker is.
Het basisprincipe van donkerveldmicroscopie is het Tyndall-effect. Wanneer een lichtstraal door een donkere kamer gaat, kan in de lucht een helder stofpad worden waargenomen vanuit de richting loodrecht op het invallende licht. Dit fenomeen is het Tyndall-effect. Nadat een donkerveldmicroscoop is vervangen door een donkerveldcondensor op een gewone optische microscoop, kan het licht dat op het oppervlak van het te inspecteren object valt, vanwege de occlusie van de interne parabolische structuur van de condensor, niet rechtstreeks het objectief binnendringen lens en oculair, en er kan alleen verstrooid licht doorheen, waardoor het gezichtsveld kleiner wordt. is donker. Omdat de donkerveldmicroscoop geen transparant licht uitzendt naar het directe observatiesysteem, is het gezichtsveld donker als er geen object is en is het onmogelijk om welk object dan ook waar te nemen; als er een object is, is het licht dat door het object wordt teruggebogen en het verstrooide licht helder zichtbaar op de donkere achtergrond. . Bij het observeren van een object in een donker veld wordt het grootste deel van het verlichtingslicht gebroken. Door de locatie, structuur en dikte van het object (preparaat) variëren de verstrooiing en breking van licht sterk.
Structuur en wijziging
De basisstructuur van een donkerveldmicroscoop is een gewone optische microscoopset plus een lichtbarrière. Een gewone microscoop kan worden omgebouwd tot een donkerveldmicroscoop, zolang de condensor verwijderbaar is en de diameter van de beugel geschikt is voor het installeren van een donkerveldcondensor. Als er geen donkerveldcondensor is, kunt u dik zwart papier gebruiken om een centraal lichtscherm te maken en dit op het filterframe onder de condensor van een gewone microscoop plaatsen om het donkerveldeffect te verkrijgen. Het lichtscherm wordt gebruikt om het licht in het midden van de lichtbron tegen te houden, zodat het licht alleen vanuit de omgeving het preparaat kan binnendringen. De grootte is ongeveer hetzelfde als de openingsgrootte. Verschillende vergrotingen gebruiken verschillende diafragma's, dus er moeten verschillende lichtblokken gemaakt worden.
Praktische toepassing
Donkerveldmicroscopie wordt vaak gebruikt om ongekleurde transparante monsters te observeren. Omdat deze monsters een brekingsindex hebben die vergelijkbaar is met die van de omringende omgeving, zijn ze moeilijk duidelijk te zien onder gewone helderveldomstandigheden. Daarom worden donkere veldomstandigheden gebruikt om het contrast tussen het monster zelf en de achtergrond te verbeteren. Dit soort microscoop kan deeltjes zo klein als 4 ~ 200 nm zien. Het kan alleen het bestaan, de beweging en de oppervlaktekenmerken van het object zien, maar kan de fijne structuur van het object niet onderscheiden. Klinisch wordt donkerveldmicroscopie vaak gebruikt om bleke spirocheten te onderzoeken. Dit is een pathogeentest, die van groot belang is voor de diagnose van vroege syfilis.
