Aanpassing van het beeldvormende optische padsysteem van de lichtmicroscoop en de schets van microscopisch onderzoek
Aanpassing van het beeldvormende optische padsysteem en het microscopisch onderzoeksoverzicht
Aanpassing van het optische beeldvormingssysteem van een microscoop wordt uitgevoerd volgens de behoeften van verschillende microscopietechnieken. De zogenaamde microscopie is in een notendop de verlichtingsmethode die wordt gebruikt bij het observeren van een monster door een microscoop, en de techniek en methode om een beter contrast te verkrijgen in het beeld dat door het monster wordt gevormd. Het volgende beschrijft kort hoe de microscopie volwassen is geworden in verschillende methoden en de bijbehorende aanpassingsmethode voor het optische systeem voor microscoopbeeldvorming.
1. Transmissie helder veld:
Dit is de meest traditionele en gebruikelijke toepassingsmethode sinds de uitvinding van de microscoop. Basiscomponenten: een. Objectieflens: elke objectieflens kan worden gebruikt voor observatie in helder veld; B. Spotting scope: Er kunnen allerlei soorten spotting scopes worden gebruikt, bij voorkeur voorzien van een diafragma. Aanpassingsmethode: Nadat het Kuhler-verlichtingssysteem van de bovenstaande microscoop is aangepast, kan de helderveldmethode worden toegepast. Toepassingsgebied: alle gekleurde weefselcoupes, bloeduitstrijkjes, enz. Voorzorgsmaatregelen: a. Bij gebruik van de helderveldobservatiemethode moet het Kuhler-verlichtingssysteem worden aangepast; B. Het diafragma van het gezichtsveld mag niet willekeurig worden geopend en de frontlens van de condensorspiegel moet feitelijk respectievelijk naar buiten en in het optische pad worden geplaatst bij gebruik van objectieflenzen van 10×, minder dan 10× en meer dan 10 ×; C. Het diafragma van de condensorspiegel mag niet worden gebruikt om de helderheid van het gezichtsveld aan te passen, en de hoogte van de condensorspiegel mag niet willekeurig worden aangepast, anders wordt de resolutie van de microscoop verlaagd en de resolutie van het gekleurde weefsel zal beschadigd raken. resolutie van de microscoop en schade is aangepast aan het Kuhler verlichtingssysteem; D. voor microfoto's moet je bij elke verandering in het gebruik van een vergroting van de objectieflens het diafragma van de condensorlens aanpassen, zodat de grootte ervan precies gelijk is aan de numerieke opening die in de objectieflens wordt gebruikt van 2/3.
2. Doorvallende lichtfasecontrastmethode:
Dit is een modern microscopisch onderzoek van een contrastverbeteringsmethode. Basiscomponenten: fasecontrastobjectief, helder gezichtsveld en fasecontrast multifunctionele spotting scope, focusstelelescoop, groene filters.
Aanpassingsmethoden:
A. Gebaseerd op de aanpassing van het Kuhler-verlichtingssysteem, focus het monster duidelijk met behulp van de helderveldmethode
B. Draai de spotting scope naar Ph1 om de schaalpositie uit te lijnen, kies een 10 × fasecontrastobjectieflens en vervang het transparante monster dat moet worden waargenomen.
C. Koppel een van de oculairs los, vervang deze door een gecentreerde telescoop en stel scherp op de twee fasecontrastringen in het gezichtsveld (de zwarte fasecontrastring van de objectieflens en de lichtdoorlatende fasecontrastring van de condensorlens).
D. De twee fasecontrastringen in het gezichtsveld hoeven niet noodzakelijkerwijs samen te vallen. Pas de twee instelapparaten op de spotting scope aan (pas de linker- en rechterposities van de fasecontrastring-instelhendel aan en pas de voor- en achterposities van de frictieknop aan) , zodat de lichttransmissiering voor de voor- en achterkant naar rechts en links samenvalt met de zwarte ring
e. Na de aanpassing schakelt u terug naar het oculair voor observatie en drukt u het groene filter in het optische pad om het fasecontrastbeeld van het monster te observeren.
F. Als er 20× en 40× objectieflenzen zijn voor observatie, moet de spottinglens op de Ph2-positie worden ingesteld, en bij gebruik van 100 objectieflenzen moet de spottinglens op de Ph3-positie worden ingesteld.
Toepassingsgebied: het is geschikt voor het observeren van transparante, ongekleurde of ongekleurde monsters, zoals allerlei soorten cellen, levende weefsels, ongekleurde of ongekleurde weefselsecties, waterorganismen enzovoort.
3. Differentiële interferentie fasecontrastmethode:
Om de fasecontrastmethode voor observatie van de monsterdetails rond het beeld, vergezeld van een halo, te overwinnen, worden de details gemaskeerd die gezien hadden moeten worden, en monsters of weefselcoupes vereisen in principe een vrij dunne dikte. dikker zijn dan 10 µm en andere beperkingen, het gebruik van het principe van dual-beam interferentie om de sub-differentiële interferentie fasecontrastmethode te ontwerpen.
Aanpassingsmethoden:
A. De DIC-methode moet worden aangepast op basis van het feit dat het Kulemin-systeem al is aangepast
B. Bepaal met behulp van een 10× objectieflens de focuspositie van de objectieflens die het monster duidelijk kan zien met een helder gezichtsveld.
C. Plaats de polarisator in het verlichtingspad en let erop dat deze in oost-westrichting moet worden georiënteerd.
D. Draai de condensorknop naar de positie die overeenkomt met het gebruik van de 10 × objectieflens, dwz DIC 0.3-0.4.
e. Plaats de DIC-schuifregelaar voor de 10× objectieflens aan de achterkant van de objectieflens of op de objectiefconverter.
F. Plaats de analysator in het optische pad voor beeldvorming en houd er rekening mee dat de oriëntatie zuid-noord moet zijn.
G. Vervang het transparante monster dat moet worden geobserveerd, schakel de lichtbron in om het monster duidelijk te focussen.
H. Pas het DIC-inzetstuk zo aan dat het differentiële interferentie-contrastbeeld het beste effect bereikt, dat wil zeggen het meest voor de hand liggende reliëfeffect.
i. Pas tegelijkertijd het diafragma van de condensorspiegel aan, zodat de werking van het contrast ook optimaal is.
J. Verfijn vervolgens de details van het monster om de structuur van het monster op verschillende niveaus te zien.
k. Als de complementaire kleur (rode vertragingsplaat van de eerste orde) wordt geplaatst en tegelijkertijd het DIC-inzetstuk wordt aangepast, zijn de steeds veranderende briljante kleuren in het gezichtsveld te zien, met rood, oranje, geel, groen, blauw, paars, roze, roze-violet en goudgeel. Toepassingsgebied: transparante of niet-kleurbare weefselcoupes, dikte tot ongeveer 100 µm, levend weefsel en levende cellen in cultuur, kleine levende organismen enzovoort.
