Gebruik methoden en voorzorgsmaatregelen voor fluorescentiemicroscopen
Wijze van gebruik:
(1) Plaats het materiaalvel op het draagplatform.
(2) Schakel de spanningsregelaar van de fluorescentiemicroscoop in. Druk vervolgens op de startgroep om de UV-lamp te ontsteken. De UV-lamp mag gedurende 15 minuten niet worden uitgeschakeld en mag gedurende 3 minuten nadat deze is uitgeschakeld, niet opnieuw worden gestart.
(3) Draai het excitatiefilter naar v, dichroïsche film naar v, kies een blokkeerfilter van 495 of 475 nm.
(4) Kies uvFL40, uvFL100 fluorescentie-ontvangende objectieflensmicroscopie.
(5) Voeg niet-fluorescerende olie toe aan het objectglaasje, eerst 40 x en vervolgens 100 x focusseringsmicroscopie. Laat fluorescentie zien.
(7) Omdat het fluorescerende materiaal door ultraviolette bestraling met de groei van de fluorescentie in de loop van de tijd geleidelijk verzwakt, moet het microscopisch onderzoek regelmatig het gezichtsveld veranderen.
(8) kan ook uvFL10- of uvFL20-microscopiemateriaal met lage vergroting gebruiken (met lage vergroting zonder toevoeging van niet-fluorescerende olie).
Fluorescentie beeldopnamemethode:
Fluorescentiebeeld gezien door fluorescentiemicroscoop, één is met morfologische kenmerken, de tweede is met de kleur en helderheid van fluorescentie. Bij het beoordelen van de resultaten moeten de twee worden gecombineerd met een alomvattend oordeel. De resultaten worden geregistreerd volgens subjectieve indicatoren, dat wil zeggen door visuele observatie door de werknemer. Als algemene kwalitatieve observatie: in principe betrouwbaar. Met de ontwikkeling van technologie en wetenschap, in verschillende mate, het gebruik van objectieve indicatoren om de resultaten van het oordeel vast te leggen, zoals het gebruik van celspectrofotometer, beeldanalysator en andere instrumenten. De resultaten die door deze instrumenten worden geregistreerd, moeten echter ook worden gecombineerd met een subjectief oordeel.
Fluorescentiemicroscoopfotografietechnologie is zeer noodzakelijk voor het opnemen van fluorescentiebeelden, omdat fluorescentie gemakkelijk vervaagt en verzwakt, zodat de resultaten van fotografie onmiddellijk kunnen worden vastgelegd. De methode is in principe hetzelfde als gewone micrografie. U hoeft alleen maar snelle fotografische film te gebruiken, zoals ASA200 hierboven of 24. hierboven. Omdat het ultraviolette licht op het fluorescentie-burst-effect, zoals FITC-markers, in de jaren '30 met ultraviolet licht bestraling, wordt de helderheid van de fluorescentie met 50% verminderd. Daarom is de belichtingssnelheid te laag om het fluorescentiebeeld vast te leggen. Fluorescentiemicroscopen voor algemeen onderzoek hebben halfautomatische of volautomatische microfotografiesysteemapparaten.
Voorzorgsmaatregelen:
(1) Werk in strikte overeenstemming met de vereisten van de fabriekshandleiding van de fluorescentiemicroscoop, verander de procedure niet willekeurig.
(2) De inspectie moet in de donkere kamer worden uitgevoerd. Nadat u de donkere kamer bent binnengegaan, sluit u de voeding aan, steekt u de ultrahogedrukkwiklamp 5-15min aan, wacht u tot de lichtbron een sterk licht uitzendt om te stabiliseren en de ogen volledig zijn aangepast aan de donkere kamer, en begin dan met het observeren van het exemplaar.
(3) Om schade aan de ogen door ultraviolet licht te voorkomen, moet bij het afstellen van de lichtbron een veiligheidsbril worden gedragen.
(4) controleer elke keer dat 1 ~ 2 uur nodig is, meer dan 90 minuten, de lichtsterkte van de ultrahogedrukkwiklamp neemt geleidelijk af, de fluorescentie verzwakt; monsters bestraald met ultraviolet licht 3 ~ 5min, de fluorescentie wordt ook aanzienlijk verzwakt; daarom mag * niet langer zijn dan 2 ~ 3 uur.
(5) De levensduur van de fluorescentiemicroscoop van de lichtbron is beperkt, het monster moet gecentraliseerde inspectie ondergaan om tijd te besparen en de lichtbron te beschermen. Als het warm is, moet er ventilatorkoeling worden toegevoegd, een nieuwe lamp moet vanaf het begin van het gebruik worden geregistreerd. Wanneer de lamp is gedoofd en opnieuw wil worden gebruikt, moet de lamp voldoende worden afgekoeld voordat deze wordt aangestoken. De lichtbron moet meerdere keren worden vermeden.
(6) Observeer het monster onmiddellijk na het kleuren, aangezien de fluorescentie na verloop van tijd geleidelijk zal afnemen. Als het monster in een polyethyleen plastic zak wordt geplaatst die bij een temperatuur van 4 graden wordt bewaard, kan dit de tijd van fluorescentieverzwakking vertragen en de verdamping van het afdichtmiddel voorkomen.
(7) Beoordelingscriteria voor fluorescentiehelderheid: over het algemeen verdeeld in vier niveaus, dat wil zeggen 'één' - geen of zichtbare zwakke fluorescentie. '+' - alleen duidelijk zichtbare fluorescentie. '+ +' - zichtbaar met een heldere
