Fluorescentiemicroscopen kunnen volgens het principe van het lichtpad in twee typen worden verdeeld:
1. Transmissiefluorescentiemicroscoop
Bij oudere fluorescentiemicroscopen gaat de excitatielichtbron door het monstermateriaal via een condensor om de fluorescentie op te wekken. Het voordeel is dat de fluorescentie sterk is bij een lage vergroting, maar het nadeel is dat de fluorescentie zwakker wordt naarmate de vergroting toeneemt. Het is dus alleen geschikt voor het observeren van grotere specimenmaterialen.
2.Epifluorescentiemicroscopie
Het excitatielicht valt vanaf de objectieflens naar beneden op het monsteroppervlak, dwz dat dezelfde objectieflens wordt gebruikt als de verlichtingscondensator en de objectieflens voor het verzamelen van fluorescentie.
Er moet een dichroïsche bundelsplitser (dichroïde spiegel) worden toegevoegd aan het optische pad, dat zich onder een hoek van 45o bevindt met de optische as. Het excitatielicht wordt gereflecteerd in de objectieflens en geconcentreerd op het monster. De door het monster gegenereerde fluorescentie wordt gereflecteerd door het oppervlak van de objectieflens en de afdekking. Het excitatielicht dat op het oppervlak van het glasplaatje wordt gereflecteerd, komt tegelijkertijd de objectieflens binnen en keert terug naar de dichroïsche bundelsplitser om het excitatielicht en de fluorescentie te scheiden. Het resterende excitatielicht wordt vervolgens geabsorbeerd door het blokkeerfilter. Als u verschillende combinatie-inzetstukken voor excitatiefilters/tweekleurige bundelsplitsers/blokkeerfilters gebruikt, kunt u aan de behoeften van verschillende fluorescentiereactieproducten voldoen.
Het voordeel van dit soort fluorescentiemicroscopen is dat het gezichtsveld gelijkmatig wordt verlicht, het beeld helder is en hoe groter de vergroting, hoe sterker de fluorescentie.
Wat zijn de belangrijkste categorieën optische microscopen?
1. Gewone optische microscoop
Gewone optische microscopen bestaan hoofdzakelijk uit de volgende onderdelen: het verlichtingssysteem, waarbij de lichtbron en condensor betrokken zijn; het optische vergrotingssysteem, dat bestaat uit de objectieflens en het oculair. Het is het meest kritische onderdeel van de microscoop en is ontworpen om overmatige sferische aberratie en chromatische aberratie te voorkomen, zowel het oculair als de objectieflens zijn samengesteld uit complexe lensgroepen.
2. Laserconfocale scanmicroscoop
De laserconfocale scanmicroscoop klinkt erg hoogwaardig en ingewikkeld. In feite gebruikt het eenvoudigweg laser als scannende lichtbron om objecten snel punt voor punt, lijn voor lijn en oppervlak voor oppervlak te scannen en in beeld te brengen.
Gebaseerd op de kortere golflengte van de laserstraal, is de straal zelf erg dun, wat bepaalt dat de confocale laserscanmicroscoop een hoge resolutie heeft, die ongeveer drie keer zo groot is als die van een gewone optische microscoop. Dit type microscoop wordt gebruikt om de celmorfologie te observeren, intracellulaire biochemische componenten kwantitatief te analyseren en de celmorfologie te meten.
3. Donkerveldmicroscoop
In het midden van de condensor van een donkerveldmicroscoop bevindt zich een lichtplaat, die voorkomt dat verlichtingslicht rechtstreeks in de objectieflens terechtkomt. Alleen het licht dat door het preparaat wordt gereflecteerd en afgebogen, kan de objectieflens binnendringen. Daarom is de achtergrond van het gezichtsveld zwart en zijn de randen van de objecten helder.
