Heb je ooit de basisprincipes van fasecontrastmicroscopie begrepen?
De fasecontrastmicroscoop werd in 1935 uitgevonden door de Nederlandse wetenschapper Zernike voor het observeren van ongekleurde preparaten. Voor levende cellen en ongekleurde biologische specimens, vanwege het verschil in de brekingsindex en de dikte van de microstructuur van elk deel van de cel, wanneer de lichtgolf er doorheen gaat, veranderen de golflengte en amplitude niet, alleen de faseveranderingen (amplitudeverschil ), die onzichtbaar is voor het menselijk oog. observeren. De fasecontrastmicroscoop verandert het faseverschil en gebruikt lichtdiffractie en interferentieverschijnselen om het faseverschil te veranderen in een amplitudeverschil om levende cellen en ongekleurde monsters te observeren. Het verschil tussen een fasecontrastmicroscoop en een gewone microscoop is dat er een ringvormig diafragma wordt gebruikt in plaats van een variabel diafragma, dat er een objectieflens met faseplaat wordt gebruikt in plaats van een gewone objectieflens en dat er een telescoop voor coaxialiteit wordt geleverd.
Basisprincipes van fasecontrastmicroscopie:
Door gebruik te maken van het verschil in brekingsindex en dikte tussen verschillende structurele componenten van het object, wordt het optische padverschil dat door verschillende delen van het object gaat, omgezet in het verschil in amplitude (lichtintensiteit), en door de condensorlens met een ringvormig diafragma en de faseverschil met een faseplaat De objectieflens realiseert de observatiemicroscoop. Het wordt voornamelijk gebruikt om levende cellen of ongekleurde weefselsecties te observeren, en soms kan het ook worden gebruikt om gekleurde monsters zonder contrast te observeren.
Het optische padverschil van het zichtbare licht dat door het preparaat gaat, wordt veranderd in een amplitudeverschil, waardoor het contrast tussen verschillende structuren wordt verbeterd en verschillende structuren duidelijk zichtbaar worden. Het licht wordt gebroken nadat het door het preparaat is gegaan, wijkt af van het oorspronkelijke optische pad en wordt vertraagd met 1/4λ (golflengte). Als het wordt verhoogd of verlaagd met 1/4λ, wordt het optische padverschil 1/2λ en interfereren de twee stralen na de lichtas. Versterk, vergroot of verlaag de amplitude, verbeter het contrast.
De fasecontrastmicroscoop heeft twee functies die andere microscopen niet hebben: ① hij scheidt het directe licht (achtergrondlicht in het gezichtsveld) van het licht dat door het object wordt afgebogen; ② het verwijdert ongeveer de helft van de golflengte uit de fase zodat het niet kan interageren, wat resulteert in een verandering in intensiteit.
