Hoe de laserintensiteit van een confocale microscoop met laserscanning aan te passen
Er zijn twee aanpassingsfactoren voor de laserintensiteit: vermogensregelknop en akoestisch-optisch afstembaar filter (AOTF)
1. Vermogensregelknop: doorgaans ingesteld op 30% van de maximale waarde. Het verhogen van de output zal de levensduur van de laser verkorten en laserruis genereren. AOTF, PMT, enz. moeten eerst worden aangepast om de beste intensiteit te verkrijgen.
2. Akoestisch-optisch afstembaar filter: regelt de excitatielichtbundel en -intensiteit, en kan de laser in- of uitschakelen of binnen milliseconden aanpassen tussen 0-100%. Dit maakt het gebruik van verschillende laserstralen voor elk beeldpunt en de selectie van de vereiste intensiteit mogelijk.
Werkingsprincipe: Het maakt gebruik van het Bragg-diffractie-effect van geluidsgolven die zich in verschillende media voortplanten op de invallende Bragg-diffractie in het voortplantingsmedium. Wanneer een bepaalde frequentie van het RF-signaal wordt ingevoerd, buigt AOTF het invallende polychromatische licht af en selecteert monochromatisch licht met de golflengte van de invoer. De golflengte van monochromatisch licht komt één-op-één overeen met de RF-frequentie f. Zolang het elektrische signaal is afgestemd, kan de uitgangsgolflengte snel en willekeurig worden gewijzigd. AOTF bereikt een continue aanpassing van de laserintensiteit en heeft een snelle aanpassingsfunctie, waardoor lokale stimulatie en scanning wordt gerealiseerd, en snelle golflengteomschakeling (microsecondeniveau). Bij laserconfocale microscopie kunnen fotomultiplicatorbuizen de intensiteit van de laser niet verhogen, maar kunnen ze wel de intensiteit van het post-imaginglicht aanpassen. Door de spanning van de fotovermenigvuldigingsbuis aan te passen, kan daarom de helderheid van het beeld worden aangepast. Bovendien beïnvloedt de grootte van het brandpuntsgaatje de hoeveelheid fotonen en kan ook de helderheid van het beeld worden aangepast. Een fotomultiplierbuis is een speciale vacuümbuis die extreem gevoelig is voor ultraviolet, zichtbaar en nabij-infraroodlicht. Het kan het binnenkomende zwakke lichtsignaal 108 keer versterken, waardoor het lichtsignaal kan worden gemeten.
