Meting van het volume van weefselblokken met behulp van biologische microscopen
Tot nu toe zijn cryofixatie, bevroren ultra-dunne coupes en vries-drogen routinemethoden voor röntgenmicroscopie van weefsel en cellen.- Geef de volgende details over deze methode op:
Een biologische microscoop met een spotlight kan de spotlight op en neer bewegen om een gematigde helderheid te bereiken, en het diafragma van het variabele diafragma kan ook worden gewijzigd om een gematigde helderheid te bereiken. Als het licht afkomstig is van de zon, kan de spot op passende wijze worden verhoogd en kan de opening van het variabele licht op passende wijze worden vergroot. Als het licht te sterk is, kan de spotlight op passende wijze worden neergelaten en kan de opening van het kruispunt op passende wijze worden verkleind. Mocht u zich in deze situatie toch verblindend voelen, dan kunt u ervoor kiezen om een passend filter op de beugel onder de spotlight te plaatsen. Deze eik kan een helderheid bereiken die u tevreden stelt. Natuurlijk kan het aanpassen van de bovenste en onderste posities van de spotlight de openingsgrootte van de lichtmeting veranderen en geschikte filters selecteren, wat een bepaalde periode van oefening en ervaring vereist.
Een zeer belangrijk onderwerp bij biologische microscopie is het proces van het bemonsteren en isoleren van cellen. Na het vries-drogen en het inbedden van hars (FD) moeten de bevroren ultra-dunne secties zorgvuldig worden verwerkt om ervoor te zorgen dat de 65 elementeninhoud van elk onderdeel niet wordt beschadigd tijdens observatie en analyse. Vanwege de vele stappen en de hoge kosten die betrokken zijn bij röntgenmicroanalyse, is het betreurenswaardig om onjuiste conclusies te trekken als de geanalyseerde cellen beschadigd of dood zijn na langdurige verwerking in meerdere stappen. De door gelatinasebehandeling gescheiden myocardcellen hebben twee vormen: de ene is lang staafvormig- en de andere is cirkelvormig. Dit laatste verwijst naar stervende cellen die beschadigd raken tijdens het proces van celscheiding.
De inhoud en verdeling van elektrolyten in deze twee soorten cellen zijn onder een biologische microscoop heel verschillend. Na is erg hoog en K is extreem laag in circulaire hartspiercellen, en de concentratie van Ca in lineaire dendrieten is erg hoog. Na verificatie met andere analytische methoden is bewezen dat de hoge Na en lage K in circulaire cellen en de hoge Ca in mitochondriën het gevolg zijn van membraanschade tijdens celscheiding. De koude fixatiemethode voor cellen en weefsels omvat vaak het eerst blussen en vervolgens opslaan in vloeibare stikstof. Uitdovende fixatie is cruciaal voor het conserveringseffect. Levende cellen of verse weefsels zijn rijk aan water, en wanneer ze worden geblust, worden de delen van de cellen of weefsels die in direct contact komen met het koelmiddel (vooral bij gebruik van vloeibare stikstof voor koeling) vaak eerst bevroren en gefixeerd, waardoor een 'omhulsel' ontstaat dat verhindert dat het centrale deel van de cellen wordt verpletterd en gefixeerd. Daarom wordt bij het uitvoeren van röntgenmicroanalyse vaak ontdekt dat er ijskristallen voorkomen in het centrale deel van grotere cellen. Om deze situatie te voorkomen, wordt een stof met een smeltpunt hoger dan vloeibare stikstof maar lager dan 806c als koelmiddel gebruikt. Er zijn veel van deze stoffen, maar ze zijn gemakkelijk te verkrijgen en de meest betaalbare is geconcentreerd propaan (kookpunt 42,120c, smeltpunt 187,10c, molecuulgewicht 44,1), dat ook een snelle afkoelsnelheid heeft. Maar het nadeel is dat het ontvlambaar is.
