Redenen waarom bacteriën moeten worden vastgesteld voordat ze in microscopie -experimenten worden gekleurd:
Het doden van cellen is gemakkelijker voor kleurstoffen om te vlekken.
Laat bacteriën vasthouden aan glazen glijbanen en niet gemakkelijk weggespoeld door water.
Bij het fixeren is het noodzakelijk om langzaam te drogen. Als het nodig is om het proces te versnellen, kunt u het een paar keer drogen vanaf een afstand boven de vlam van de alcohollamp. Droog de glazen schuif niet totdat deze opwarmt, anders kan het de vorm van bacterie beschadigen
Gramkleuring en microscopische observatie van bacteriën
Experimenteel principe
Het principe van gramkleuring: verschillende reacties van bacteriën op gramkleuring worden veroorzaakt door verschillen in de samenstelling en structuur van hun celwanden. De celwand van gram positieve bacteriën bestaat voornamelijk uit een netwerk van peptidoglycanen. Wanneer het met ethanol wordt behandeld, veroorzaakt uitdroging een afname van de poriegrootte en permeabiliteit van de netwerkstructuur, waardoor het voor het kristalvioletjodiumcomplex moeilijk kan worden weggespoeld en in de cel wordt behouden. Na ontkleuring en tegenkleuring wordt de blauwe paarse kleur van de initiële kleurstof nog steeds behouden. De peptidoglycan -laag op de celwand van gram negatieve bacteriën is dun en heeft een hoog lipidengehalte. Daarom wordt het lipide opgelost in ethanol (of aceton) opgelost, waardoor de permeabiliteit van de celwand wordt vergroot en het gemakkelijker wordt om het kristalvioletjodiumcomplex uit te wassen. Na tegenkleuring met een tegenkleuring worden de cellen gekleurd met de rode kleur van de tegenkleuring. Microscope Imaging Principle: moderne gewone optische microscopen gebruiken twee sets lenssystemen, een oculair en een objectieve lens, om te vergroten en beeld, zodat ze vaak samengestelde microscopen worden genoemd. In het optische systeem van een microscoop is de prestaties van de objectieve lens de meest kritische, en de vergroting van de olielens is de hoogste, wat het belangrijkste is voor microbiologisch onderzoek. Het toevoegen van lensolie tussen de glazen schuif en de lens is voornamelijk om de helderheid van de verlichting te vergroten en de resolutie van de microscoop te verbeteren. Het gebruik van olie in plaats van lucht als medium voor lichtpropagatie vermindert de breking of totale reflectie van licht, waardoor het waargenomen beeld duidelijker wordt.
