Verschillende problemen bij het gebruik van fasecontrastmicroscopie:
(1) Fase-omkering wanneer n '
(2) Het halo- en geleidelijk dimeffect in het beeldvormingsproces van fasecontrastmicroscopie, wanneer een structuur donkerder wordt als gevolg van fasevertraging, is geen lichtverlies, maar een resultaat van lichtherverdeling op het beeldvlak. Daarom zal licht dat duidelijk verdwijnt in donkere gebieden verschijnen als een heldere halo rond donkere objecten. Dit is een nadeel van fasecontrastmicroscopie, dat de waarneming van fijne structuren belemmert. Wanneer de ringvormige opening erg smal is, is het halo-fenomeen ernstiger. Een ander fenomeen van fasecontrastmicroscopie is het dimeffect, dat verwijst naar een afname van het contrast aan de randen van een groter gebied met dezelfde fasevertraging die wordt waargenomen tijdens fasecontrastobservatie.
(3) De invloed van de monsterdikte Bij het waarnemen van het verschil moet de dikte van het monster 5 μm of dunner zijn. Bij gebruik van dikkere monsters is de bovenste laag van het monster helder, terwijl de diepere laag wazig zal zijn en faseverschuivingsinterferentie en lichtverstrooiingsinterferentie zal veroorzaken.
(4) De invloed van dekglas en het glaasje op het monster moet worden afgedekt met een dekglas, anders kunnen de heldere ring van de ringvormige opening en de donkere ring van de faseplaat elkaar moeilijk overlappen. Differentiële waarneming stelt ook hoge eisen aan de kwaliteit van het glas van het schuif- en dekglas. Als er krassen, ongelijkmatige dikte of ongelijkmatige oneffenheden zijn, kan dit vervorming van de heldere ring en fase-interferentie veroorzaken. Als het glasplaatje bovendien te dik of te dun is, zal de ringvormige opening groter of kleiner worden.
Momenteel zijn optische microscopen geëvolueerd van traditionele biologische microscopen naar verschillende soorten gespecialiseerde microscopen. Volgens hun beeldvormingsprincipes kunnen ze worden onderverdeeld in:
① Geometrische optische microscoop: inclusief biologische microscoop, vallende lichtmicroscoop, omgekeerde microscoop, metallografische microscoop, donkerveldmicroscoop, enz.
② Fysieke optische microscoop: inclusief fasecontrastmicroscoop, polarisatiemicroscoop, interferentiemicroscoop, fasecontrastpolarisatiemicroscoop, fasecontrastinterferentiemicroscoop, fasecontrastfluorescentiemicroscoop, enz.
③ Informatieconversiemicroscopen: inclusief fluorescentiemicroscopen, microspectrometers, beeldanalysemicroscopen, akoestische microscopen, fotografische microscopen, televisiemicroscopen, enz.
Noem enkele toepassingen van microscopen: a Biologische microscoop: Over het algemeen kunnen microscopen worden onderverdeeld in stereomicroscopen en biologische microscopen. Door verschillende doeleinden en eisen zijn er veel branches ontstaan, maar de basisprincipes blijven hetzelfde. Polarisatie, fasecontrast, transmissie en vallend licht worden nog steeds geclassificeerd als biologische microscopen. Stereoscopische microscoop, ook bekend als anatomische microscoop, vaste microscoop en stereomicroscoop, is een veelzijdige microscoop. Het is eenvoudig te bedienen, stelt weinig eisen aan monsters, heeft een lange werkafstand en heeft een sterk gevoel voor driedimensionaliteit bij het observeren. Het kan worden gebruikt om fysieke objecten te observeren of om tijdens het observeren bepaalde bewerkingen op monsters uit te voeren. In plaats van het monster in plakjes te snijden zoals een biologische microscoop, vereist het snijden de overeenkomstige technologie en apparatuur. Daarom hebben stereomicroscopen een breed scala aan toepassingen op gebieden als micro-elektronica, assemblage en onderhoud van precisie-instrumenten, en micrograveren. Op grote schaal gebruikt in de anatomie en microchirurgie op het gebied van biologie en geneeskunde (momenteel geclassificeerd als chirurgische microscopen), kan de lichtbron die in de biologie en geneeskunde wordt gebruikt alleen een bron van koud licht zijn (glasvezel); Gebruikt in de industrie voor observatie, montage, inspectie en ander werk van kleine onderdelen en geïntegreerde schakelingen. Metallografische microscoop: Veel mensen schrijven het graag als "metallografische microscoop". Metallografische microscoop is een microscoop die specifiek wordt gebruikt om de metallografische structuur van ondoorzichtige voorwerpen zoals metalen en mineralen te observeren. Deze ondoorzichtige objecten kunnen niet worden waargenomen met een gewone transmissiemicroscoop, dus het belangrijkste verschil tussen hen en een gewone microscoop is dat de eerste gereflecteerd licht gebruikt, terwijl de laatste doorvallend licht gebruikt voor verlichting. In een metallografische microscoop wordt de verlichtingsbundel van de objectieflens naar het oppervlak van het waargenomen object gericht, gereflecteerd door het oppervlak en vervolgens teruggestuurd naar de objectieflens voor beeldvorming. Deze reflecterende verlichtingsmethode wordt ook veel gebruikt bij de detectie van siliciumwafels met geïntegreerde schakelingen.
