De principes en structurele kenmerken van fluorescentiemicroscopen
Fluorescentiemicroscoop maakt gebruik van een zeer efficiënte puntlichtbron om een bepaalde golflengte van licht (zoals ultraviolet licht 3650 of paarsblauw licht 4200) uit te zenden via een kleurenfiltersysteem als excitatielicht, dat fluorescerende stoffen in het monster exciteert om verschillende kleuren fluorescentie uit te zenden, en neemt vervolgens waar door de vergroting van de objectieflens en het oculair. Op deze manier is het, zelfs met zwakke fluorescentie op een sterke achtergrond, gemakkelijk te herkennen en heeft het een hoge gevoeligheid. Het wordt voornamelijk gebruikt voor de studie van celstructuur, functie en chemische samenstelling. De basisstructuur van een fluorescentiemicroscoop bestaat uit een gewone optische microscoop en enkele accessoires, zoals een fluorescerende lichtbron, een excitatiefilter, een tweekleurige straalsplitser en een blokkeerfilter. De fluorescentielichtbron - maakt gewoonlijk gebruik van ultra-hogedrukkwiklampen (50-200 W), die licht van verschillende golflengten kunnen uitstralen, maar elke fluorescerende stof heeft een excitatielichtgolflengte die de sterkste fluorescentie produceert. Daarom moeten excitatiefilters (meestal ultraviolette, paarse, blauwe en groene excitatiefilters) worden toegevoegd om alleen een bepaalde golflengte van excitatielicht door te laten en het monster te bestralen, terwijl al het andere licht wordt geabsorbeerd. Na bestraling met excitatielicht zendt elke stof in zeer korte tijd zichtbare fluorescentie uit met een golflengte die langer is dan de bestralingsgolflengte. Fluorescentie heeft specificiteit en is over het algemeen zwakker dan excitatielicht. Om specifieke fluorescentie waar te nemen, moet achter de objectieflens een blokkerend (of onderdrukkend) filter worden toegevoegd.
De functies ervan zijn tweeledig: ten eerste het absorberen en blokkeren van excitatielicht dat het oculair binnendringt om verstoring van de fluorescentie en beschadiging van de ogen te voorkomen; ten tweede, om specifieke fluorescentie te selecteren en door te laten, waarbij een specifieke fluorescerende kleur wordt vertoond. Er moeten twee soorten filters in combinatie worden gebruikt.
