De rol van elk filter in fluorescentiemicroscopie
Het meest cruciale probleem bij fluorescentiemicroscopie is de combinatie van filters, en zowel het excitatiefilter als het afschermingsfilter moeten geschikt zijn voor het waargenomen fluorescerende lichaam en op elkaar afgestemd zijn. Als er bij bepaalde specifieke doeleinden een fout optreedt bij het selecteren van een filter, kan dit leiden tot misverstanden en zelfs onjuiste resultaten. De prestaties van de fluorescentiemicroscopietechnologie en het gebruik van hoogwaardige filters en ingenieuze filtergroepen zijn onlosmakelijk met elkaar verbonden. Er zijn verschillende soorten filters voor fluorescentiemicroscopie.
1. Warmte-absorberend filter
Warmte-absorberend filter is een noodzakelijk filter om te voorkomen dat thermische straling in het lichtbronspectrum de optische apparaatgroep beschadigt. Vroege geavanceerde microscopen waren uitgerust met trommelvormige flessen die gedestilleerd water konden bevatten als warmte-absorberende apparaten. Moderne grootschalige onderzoeksmicroscopen zijn uitgerust met glazen warmteabsorberende filters in lichtbakken of kamers van lichtbronnen, die transparante, lichtgele glasplaten zijn. De KG1 (2 mm) en BG38 (4 mm) filters van Leitz kunnen vrijwel alle ultraviolette en zichtbare lichtspectra doorlaten, waardoor ze filters zijn met een lichtstroom tot 98%. Het absorbeert alleen selectief infrarode fotothermische stralingslijnen.
2. Excitatiefilter
Excitatiefilters kunnen selectief spectraallijnen met lange golflengte absorberen en alleen ultraviolet licht doorlaten. Filters voor paars, blauw en groen licht zijn excitatiefilters. Zeiss, Reichert, Olympus B-serie, G-serie, BG-serie, Shott UG-serie, Opton H, G, BP-serie, Leitz BP-serie en andere filters zijn allemaal excitatiefilters.
3. Blokkeerfilter
Blokkeerfilter is een filter dat selectief spectraallijnen met korte golflengte en infraroodstraling absorbeert, waardoor de waarnemer de fluorescentie kan zien die wordt uitgezonden door het te testen object, terwijl het hoornvlies wordt beschermd tegen UV-schade.
4. Kleurlichtscheidingsfilter
Kleurlichtscheidingsfilter is een filter dat het excitatielicht reflecteert op het te testen object, waardoor het object fluorescentie uitstraalt en de fluorescentie vervolgens doorgeeft aan het oculair. Dit type filter kan alleen worden gebruikt in concentrators met vallende bundel, terwijl fluorescentiemicroscopie met transmissielicht geen kleurscheiding vereist.
5. Interferentiefilter
Interferentiefilter is een type krachtig excitatiefilter. Het is een filter dat wordt gemaakt door verschillende dunne metaalfilms tussen twee gepolijste glasplaten te stapelen. De brekingsindex van elke dunne metaalfilm is anders, zodat de spectraallijnen met verschillende golflengten van de verlichtingslichtbron herhaaldelijk op elke metaalfilm worden gereflecteerd, waardoor sommige golflengten van de spectraallijnen worden opgeheven als gevolg van destructieve interferentie, terwijl andere worden versterkt door additieve interferentie en doorgegeven via. Dit resulteert in een filter met een smal transmissiespectrum, een halve piekbreedte van slechts 6~20nm en een transmissie van 60%~70%.
