Waarom is de vergroting van een olielens groter dan die van een gewone objectieflens?
Redenen waarom bacteriën moeten worden gefixeerd voordat ze worden gekleurd in microbiologische experimenten:
1: Dood cellen en maak de kleurstof gemakkelijk te kleuren.
Twee: zorg ervoor dat de bacteriën zich aan het glasplaatje hechten en niet gemakkelijk door water worden weggespoeld.
Droog tijdens het fixeren langzaam. Als je het proces echt wilt versnellen, kun je het een paar keer laten drogen op een afstand boven de vlam van een alcohollamp. Droog het glas niet zodat het opwarmt, anders kan de bacteriële levensvorm worden vernietigd.
Gramkleuring en microscopische observatie van bacteriën
Experimenteel principe
Principe van Gram-kleuring: De verschillende reacties van bacteriën op Gram-kleuring zijn te wijten aan de verschillende samenstelling en structuur van hun celwanden. De celwand van Gram-positieve bacteriën bestaat voornamelijk uit een netwerk van peptidoglycanen. Bij behandeling met ethanol wordt de poriegrootte van de netwerkstructuur kleiner als gevolg van dehydratatie en neemt de permeabiliteit af, waardoor het complex van kristalviolet-jodium ontstaat. De stof wordt niet gemakkelijk geëlueerd en blijft in de cellen achter. Na ontkleuring en tegenkleuring blijft de blauwpaarse kleur van de primaire kleurstof behouden. De celwandpeptidoglycanlaag van Gram-negatieve bacteriën is dun en heeft een hoog lipidengehalte. Daarom worden de lipiden tijdens de ontkleuring opgelost door ethanol (of aceton) en neemt de permeabiliteit van de celwand toe, waardoor het kristalviolet-jodiumcomplex relatief gemakkelijk kan worden geëlueerd. Na tegenkleuring met tegenkleuring worden de cellen gekleurd met de rode kleur van de tegenkleuring. Principe van microscoopbeeldvorming: Moderne gewone optische microscopen gebruiken twee lenssystemen, oculairs en objectieflenzen, om beelden te vergroten, daarom worden ze vaak samengestelde microscopen genoemd. In het optische systeem van een microscoop zijn de prestaties van de objectieflens het meest kritisch. De olielens heeft de grootste vergroting en is het belangrijkst voor microbiologisch onderzoek. Het belangrijkste doel van het toevoegen van druppels lensolie tussen het objectglaasje en de lens is het verhogen van de helderheid van de verlichting en het verhogen van de resolutie van de microscoop. Het gebruik van olie in plaats van lucht als lichtvoortplantingsmedium vermindert de breking of totale reflectie van licht, waardoor het waargenomen beeld duidelijker wordt.
Zoek naar de bacteriekolonies die je wilt observeren onder een microscoop met een lage vergroting (blijf het objectglaasje bewegen, als je een rode schaduw voelt, stop dan onmiddellijk, pas de vergroting aan, als het geen kolonie is, blijf kijken), breng de lenscilinder omhoog en schakel vervolgens over naar de olielens. Voeg een druppel cederolie toe aan het monstergebied en gebruik de grofafsteller om de lenscilinder voorzichtig te laten zakken, zodat de olielens wordt ondergedompeld in de lensolie en bijna in contact komt met het monster. Zet de condensor in de hoogste stand en open de opening. Gebruik de grofafsteller om de lenscilinder langzaam omhoog te brengen totdat het objectbeeld in het gezichtsveld verschijnt en gebruik de fijnafsteller om het helder en scherp te maken.
