WPROWADZENIE DO ZALET I WAD WIELOFOTONOWEJ MIKROSKOPII SKANINGOWEJ Laserowej
Voordelen van multiphoton laserscanmicroscoop:
1. Gewogen door rood of infraroodlicht, is lichtverstrooiing klein en is de verstrooiing van kleine deeltjes omgekeerd evenredig met de vierde kracht van de golflengte.
2. Meer verspreide fotonen van de beeldvormende dwarsdoorsnede kunnen worden verzameld zonder de noodzaak van pinholes.
3. Pinholes kunnen geen onderscheid maken tussen verspreide fotonen die worden uitgezonden uit onschuldig of focale gebieden, en multiphotonen hebben een betere signaal-ruisverhouding in diepe beeldvorming.
4. Het ultraviolette of zichtbare licht dat wordt gebruikt voor een enkele fotonuitexcitatie wordt gemakkelijk geabsorbeerd en verzwakt door het monster voordat de straal het brandvlak bereikt, waardoor het moeilijk is om diepe lagen te opwinden.
5. In termen van observatie van biologische microscopie is de eerste overweging om de actieve toestand van het organisme zelf niet te beschadigen, de circulatie van water, ionenconcentratie, zuurstof en voedingsstoffen te handhaven. In het gebied van lichtobservatie moeten zowel thermische als fotonenergie binnen de bestraling dosis en lichte energie blijven die cellen niet beschadigen.
6. Multiphoton -microscopie heeft veel voordelen. In termen van driedimensionale resolutie, diepte-invasie, verstrooiingsefficiëntie, achtergrondlicht, signaal-ruisverhouding, controle, enz., Zijn er kenmerken die eerdere lasermicroscopen niet bezitten of niet kunnen overtreffen
Nadelen van multiphoton laserscanmicroscoop:
1. Alleen voor fluorescentiebeeldvorming.
2. Als het monster chromoforen omvat die excitatielicht kunnen absorberen, kan het monster worden onderworpen aan thermische schade.
3. De resolutie is enigszins verminderd, hoewel deze kan worden verbeterd door tegelijkertijd confocale kleine gaten te gebruiken, is er signaalverlies.
4. Vanwege de beperkingen van dure ultrasnelle lasers zijn de kosten van multiphoton scanning microscopen relatief hoog.
