Technieken voor observatie met optische microscopie
Een optische microscoop is een optisch instrument dat licht gebruikt als lichtbron om kleine structuren te vergroten en te observeren die onzichtbaar zijn voor het blote oog. De eerste microscoop werd gemaakt door een opticien in 1604.
In de afgelopen twee decennia hebben wetenschappers ontdekt dat optische microscopen kunnen worden gebruikt om objecten te detecteren, te volgen en af te beelden die kleiner zijn dan de helft van de golflengte van conventioneel zichtbaar licht, of een paar honderd nanometer.
Omdat lichtmicroscopen traditioneel niet worden gebruikt om de nanoschaal te bestuderen, missen ze vaak een gekalibreerde vergelijking met een standaard om te controleren of de resultaten correct zijn voor nauwkeurige informatie op die schaal. Microscopie kan precies en consistent dezelfde locatie van een enkel molecuul of nanodeeltje aangeven. Tegelijkertijd kan het echter zeer onnauwkeurig zijn, en de positie van een object dat door een microscoop tot op een miljardste van een meter wordt geïdentificeerd, kan in feite binnen een miljoenste van een meter liggen, omdat er geen fout is.
Optische microscopen zijn gebruikelijk bij laboratoriuminstrumenten en kunnen gemakkelijk verschillende monsters vergroten, variërend van delicate biologische monsters tot elektrische en mechanische apparaten. Evenzo worden optische microscopen capabeler en betaalbaarder omdat ze de wetenschappelijke versie van lichten en camera's in uw smartphone combineren.
Gemeenschappelijke observatiemethoden van optische microscopie
Differentiële Interferentie Interferentie (DIC) Observatie Methode
beginsel
Het gepolariseerde licht wordt ontleed in onderling loodrechte bundels van gelijke intensiteit door een speciaal prisma, en de bundels gaan door het object op twee zeer dicht bij elkaar gelegen punten (minder dan de resolutie van de microscoop), zodat er een klein faseverschil is, waardoor het beeld driedimensionaal lijkt Driedimensionaal gevoel.
functies
Het kan het te inspecteren object een driedimensionaal stereoscopisch effect laten produceren en het observatie-effect is intuïtiever. Er is geen speciale objectieflens nodig, het werkt beter met fluorescentiewaarneming en kan de kleurveranderingen van de achtergrond en objecten aanpassen om het gewenste effect te bereiken.
observatiemethode in het donkere veld
Donkerveld is eigenlijk donkerveldverlichting. De kenmerken zijn anders dan die van een helder veld. Het neemt het licht van de verlichting niet rechtstreeks waar, maar neemt het licht waar dat wordt gereflecteerd of afgebogen door het te inspecteren object. Daarom is het gezichtsveld een donkere achtergrond, terwijl het te inspecteren object een helder beeld geeft.
Het principe van het donkere veld is gebaseerd op het Tyndall-fenomeen in de optica. Wanneer het stof direct door sterk licht wordt gepasseerd, kan het menselijk oog het niet waarnemen, wat wordt veroorzaakt door de diffractie van sterk licht. Als het licht er schuin op schijnt, lijkt het deeltje door de reflectie van het licht groter te worden en is het zichtbaar voor het menselijk oog. Een speciale accessoire die nodig is voor donkerveldwaarneming is een donkerveldcondensor. Het kenmerk is dat het de lichtstraal niet van onder naar boven door het object laat gaan, maar de baan van het licht verandert zodat het schuin naar het object toe schiet, zodat het verlichtende licht niet rechtstreeks in de objectieflens komt, en gebruikt het reflectie- of diffractielicht gevormd door het oppervlak van het object Helder beeld. De resolutie van donkerveldwaarneming is veel hoger dan die van helderveldwaarneming en bereikt 0.02-0.004 μm.
